സിൽവർ നൈട്രേറ്റ് ഡ്രെസ്സിംഗുകളുടെ ആന്റി-ബയോഫിലിം പ്രഭാവവും രോഗശാന്തിയുടെ ഉത്തേജനവും.

Nature.com സന്ദർശിച്ചതിന് നന്ദി. നിങ്ങൾ ഉപയോഗിക്കുന്ന ബ്രൗസറിന്റെ പതിപ്പിന് പരിമിതമായ CSS പിന്തുണ മാത്രമേ ഉള്ളൂ. മികച്ച ഫലങ്ങൾക്കായി, നിങ്ങളുടെ ബ്രൗസറിന്റെ പുതിയ പതിപ്പ് ഉപയോഗിക്കാൻ ഞങ്ങൾ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു (അല്ലെങ്കിൽ ഇന്റർനെറ്റ് എക്സ്പ്ലോററിൽ കോംപാറ്റിബിലിറ്റി മോഡ് പ്രവർത്തനരഹിതമാക്കുക). അതേസമയം, തുടർച്ചയായ പിന്തുണ ഉറപ്പാക്കാൻ, സ്റ്റൈലിംഗോ ജാവാസ്ക്രിപ്റ്റോ ഇല്ലാതെ ഞങ്ങൾ സൈറ്റ് പ്രദർശിപ്പിക്കുന്നു.
മുറിവുകളിലെ സൂക്ഷ്മജീവികളുടെ വളർച്ച പലപ്പോഴും ബയോഫിലിമുകളായി പ്രത്യക്ഷപ്പെടുന്നു, ഇത് രോഗശാന്തിയെ തടസ്സപ്പെടുത്തുകയും ഇല്ലാതാക്കാൻ പ്രയാസവുമാണ്. പുതിയ സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ മുറിവ് അണുബാധകളെ ചെറുക്കുമെന്ന് അവകാശപ്പെടുന്നു, പക്ഷേ അവയുടെ ആന്റിബയോഫിലിം ഫലപ്രാപ്തിയും അണുബാധയെ ആശ്രയിക്കാത്ത രോഗശാന്തി ഫലങ്ങളും പൊതുവെ അജ്ഞാതമാണ്. സ്റ്റാഫൈലോകോക്കസ് ഓറിയസിന്റെയും സ്യൂഡോമോണസ് എരുഗിനോസയുടെയും ഇൻ വിട്രോയിലും ഇൻ വിവോ ബയോഫിലിം മോഡലുകൾ ഉപയോഗിച്ച്, Ag1+ അയോൺ-ജനറേറ്റിംഗ് ഡ്രെസ്സിംഗുകളുടെ ഫലപ്രാപ്തി ഞങ്ങൾ റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യുന്നു; എഥിലീനെഡിയാമിനെറ്റെട്രാഅസെറ്റിക് ആസിഡും ബെൻസെത്തോണിയം ക്ലോറൈഡും (Ag1+/EDTA/BC) അടങ്ങിയ Ag1+ ഡ്രെസ്സിംഗുകളും, സിൽവർ നൈട്രേറ്റ് (Ag ഓക്സിസാൾട്ടുകൾ) അടങ്ങിയ ഡ്രെസ്സിംഗുകളും, മുറിവ് ബയോഫിലിമിനെയും അതിന്റെ രോഗശാന്തിയിലെ ഫലത്തെയും ചെറുക്കുന്നതിന് Ag1+, Ag2+, Ag3+ അയോണുകൾ ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്നു. ഇൻ വിട്രോയിലും എലികളിലും (C57BL/6j) മുറിവ് ബയോഫിലിമിൽ Ag1+ ഡ്രെസ്സിംഗുകൾക്ക് കുറഞ്ഞ സ്വാധീനമേ ഉണ്ടായിരുന്നുള്ളൂ. ഇതിനു വിപരീതമായി, ഓക്സിജൻ അടങ്ങിയ Ag ലവണങ്ങളും Ag1+/EDTA/BC ഡ്രെസ്സിംഗുകളും ഇൻ വിട്രോയിലെ ബയോഫിലിമുകളിലെ ബാക്ടീരിയകളുടെ എണ്ണം ഗണ്യമായി കുറയ്ക്കുകയും മൗസ് മുറിവിലെ ബയോഫിലിമുകളിലെ ബാക്ടീരിയ, EPS ഘടകങ്ങളിൽ ഗണ്യമായ കുറവ് കാണിക്കുകയും ചെയ്തു. ബയോഫിലിം ബാധിച്ചതും അല്ലാത്തതുമായ മുറിവുകളുടെ രോഗശാന്തിയിൽ ഈ ഡ്രെസ്സിംഗുകൾക്ക് വ്യത്യസ്ത ഫലങ്ങളുണ്ടായിരുന്നു, കൂടാതെ നിയന്ത്രണ ചികിത്സകളെയും മറ്റ് സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗുകളെയും അപേക്ഷിച്ച് ഓക്സിജൻ അടങ്ങിയ ഉപ്പ് ഡ്രെസ്സിംഗുകൾക്ക് റീഎപിത്തീലിയലൈസേഷൻ, മുറിവിന്റെ വലുപ്പം, വീക്കം എന്നിവയിൽ കൂടുതൽ ഗുണം ഉണ്ട്. സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗുകളുടെ വ്യത്യസ്ത ഭൗതിക രാസ ഗുണങ്ങൾക്ക് മുറിവ് ബയോഫിലിമിലും രോഗശാന്തിയിലും വ്യത്യസ്ത ഫലങ്ങൾ ഉണ്ടാകാം, കൂടാതെ ബയോഫിലിം ബാധിച്ച മുറിവുകളുടെ ചികിത്സയ്ക്കായി ഒരു ഡ്രസ്സിംഗ് തിരഞ്ഞെടുക്കുമ്പോൾ ഇത് പരിഗണിക്കണം.
"ക്രമീകൃതവും സമയബന്ധിതവുമായ രീതിയിൽ രോഗശാന്തിയുടെ സാധാരണ ഘട്ടങ്ങളിലൂടെ പുരോഗമിക്കാത്ത മുറിവുകൾ" എന്നാണ് വിട്ടുമാറാത്ത മുറിവുകളെ നിർവചിച്ചിരിക്കുന്നത്. 1. രോഗികൾക്കും ആരോഗ്യ സംരക്ഷണ സംവിധാനത്തിനും മാനസികവും സാമൂഹികവും സാമ്പത്തികവുമായ ഒരു ഭാരം സൃഷ്ടിക്കുന്നു. മുറിവുകളും അനുബന്ധ രോഗങ്ങളും ചികിത്സിക്കുന്നതിനുള്ള വാർഷിക NHS ചെലവ് 2017–182 ൽ £8.3 ബില്യൺ ആയി കണക്കാക്കപ്പെടുന്നു. യുണൈറ്റഡ് സ്റ്റേറ്റ്സിൽ വിട്ടുമാറാത്ത മുറിവുകൾ നിലവിൽ ഒരു അടിയന്തര പ്രശ്നമാണ്, മെഡികെയർ മുറിവുകളുള്ള രോഗികളെ ചികിത്സിക്കുന്നതിനുള്ള വാർഷിക ചെലവ് $28.1–$96.8 ബില്യൺ3 ആയി കണക്കാക്കുന്നു.
മുറിവ് ഉണങ്ങുന്നത് തടയുന്ന ഒരു പ്രധാന ഘടകമാണ് അണുബാധ. പലപ്പോഴും അണുബാധകൾ ബയോഫിലിമുകളായി പ്രത്യക്ഷപ്പെടുന്നു, ഇവ 78% ഉണങ്ങാത്ത വിട്ടുമാറാത്ത മുറിവുകളിലും കാണപ്പെടുന്നു. സൂക്ഷ്മാണുക്കൾ മുറിവ് പോലുള്ള പ്രതലങ്ങളിൽ മാറ്റാനാവാത്തവിധം പറ്റിപ്പിടിച്ചിരിക്കുമ്പോൾ ബയോഫിലിമുകൾ രൂപം കൊള്ളുന്നു, കൂടാതെ എക്സ്ട്രാ സെല്ലുലാർ പോളിമർ (ഇപിഎസ്) ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്ന കമ്മ്യൂണിറ്റികൾ രൂപപ്പെടാൻ ഇത് കൂട്ടുന്നു. മുറിവ് ബയോഫിലിം വർദ്ധിച്ച കോശജ്വലന പ്രതികരണവുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു, ഇത് ടിഷ്യു കേടുപാടുകൾക്ക് കാരണമാകുന്നു, ഇത് രോഗശാന്തിയെ വൈകിപ്പിക്കുകയോ തടയുകയോ ചെയ്യും4. ടിഷ്യു കേടുപാടുകൾ വർദ്ധിക്കുന്നത് മാട്രിക്സ് മെറ്റലോപ്രോട്ടീനേസുകൾ, കൊളാജനേസ്, എലാസ്റ്റേസ്, റിയാക്ടീവ് ഓക്സിജൻ സ്പീഷീസുകൾ5 എന്നിവയുടെ വർദ്ധിച്ച പ്രവർത്തനത്തിന്റെ ഭാഗമാകാം. മാത്രമല്ല, കോശജ്വലന കോശങ്ങളും ബയോഫിലിമുകളും ഓക്സിജന്റെ ഉയർന്ന ഉപഭോക്താക്കളാണ്, അതിനാൽ പ്രാദേശിക ടിഷ്യു ഹൈപ്പോക്സിയയ്ക്ക് കാരണമാകും, ഫലപ്രദമായ ടിഷ്യു നന്നാക്കലിന് ആവശ്യമായ സുപ്രധാന ഓക്സിജന്റെ കോശങ്ങളെ ഇല്ലാതാക്കുന്നു6.
പ്രായപൂർത്തിയായ ബയോഫിലിമുകൾ ആന്റിമൈക്രോബയൽ ഏജന്റുകളോട് ഉയർന്ന പ്രതിരോധശേഷിയുള്ളവയാണ്, അതിനാൽ ബയോഫിലിം അണുബാധകളെ നിയന്ത്രിക്കുന്നതിന് ആക്രമണാത്മക തന്ത്രങ്ങൾ ആവശ്യമാണ്, ഉദാഹരണത്തിന് മെക്കാനിക്കൽ ചികിത്സയും തുടർന്ന് ഫലപ്രദമായ ആന്റിമൈക്രോബയൽ ചികിത്സയും. ബയോഫിലിമുകൾക്ക് വേഗത്തിൽ പുനരുജ്ജീവിപ്പിക്കാൻ കഴിയുമെന്നതിനാൽ, ഫലപ്രദമായ ആന്റിമൈക്രോബയലുകൾ ശസ്ത്രക്രിയാ ഡീബ്രൈഡ്മെന്റിനുശേഷം വീണ്ടും രൂപപ്പെടാനുള്ള സാധ്യത കുറയ്ക്കും7.
ആന്റിമൈക്രോബയൽ ഡ്രെസ്സിംഗുകളിൽ വെള്ളി കൂടുതലായി ഉപയോഗിക്കുന്നു, കൂടാതെ വിട്ടുമാറാത്ത അണുബാധയുള്ള മുറിവുകൾക്കുള്ള ആദ്യ നിര ചികിത്സയായി ഇത് പലപ്പോഴും ഉപയോഗിക്കുന്നു. വാണിജ്യപരമായി ലഭ്യമായ നിരവധി വെള്ളി ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ ഉണ്ട്, ഓരോന്നിനും വ്യത്യസ്തമായ വെള്ളി ഘടന, സാന്ദ്രത, ബേസ് മാട്രിക്സ് എന്നിവ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു. വെള്ളി ആംബാൻഡുകളിലെ പുരോഗതി പുതിയ വെള്ളി ആംബാൻഡുകളുടെ വികാസത്തിലേക്ക് നയിച്ചു. വെള്ളിയുടെ ലോഹ രൂപം (Ag0) നിഷ്ക്രിയമാണ്; ആന്റിമൈക്രോബയൽ ഫലപ്രാപ്തി കൈവരിക്കുന്നതിന്, അത് ഒരു ഇലക്ട്രോൺ നഷ്ടപ്പെടുത്തി അയോണിക് സിൽവർ (Ag1+) രൂപപ്പെടുത്തണം. പരമ്പരാഗത വെള്ളി ഡ്രെസ്സിംഗുകളിൽ വെള്ളി സംയുക്തങ്ങളോ ലോഹ വെള്ളിയോ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു, അവ ദ്രാവകവുമായി സമ്പർക്കം പുലർത്തുമ്പോൾ, വിഘടിച്ച് Ag1+ അയോണുകൾ ഉണ്ടാക്കുന്നു. ഈ Ag1+ അയോണുകൾ ബാക്ടീരിയൽ കോശവുമായി പ്രതിപ്രവർത്തിച്ച്, ഘടനാപരമായ ഘടകങ്ങളിൽ നിന്നോ അതിജീവനത്തിന് ആവശ്യമായ നിർണായക പ്രക്രിയകളിൽ നിന്നോ ഇലക്ട്രോണുകളെ നീക്കംചെയ്യുന്നു. പേറ്റന്റ് ചെയ്ത സാങ്കേതികവിദ്യ മുറിവ് ഡ്രെസ്സിംഗുകളിൽ ഉൾപ്പെടുത്തിയിരിക്കുന്ന Ag ഓക്സിസാൾട്ടുകൾ (സിൽവർ നൈട്രേറ്റ്, Ag7NO11) എന്ന പുതിയ വെള്ളി സംയുക്തത്തിന്റെ വികാസത്തിലേക്ക് നയിച്ചു. പരമ്പരാഗത വെള്ളിയിൽ നിന്ന് വ്യത്യസ്തമായി, ഓക്സിജൻ അടങ്ങിയ ലവണങ്ങളുടെ വിഘടനം ഉയർന്ന വാലൻസ് (Ag1+, Ag2+, Ag3+) ഉള്ള വെള്ളിയുടെ അവസ്ഥകൾ സൃഷ്ടിക്കുന്നു. സ്യൂഡോമോണസ് എരുഗിനോസ, സ്റ്റാഫൈലോകോക്കസ് ഓറിയസ്, എസ്ഷെറിച്ചിയ കോളി തുടങ്ങിയ രോഗകാരികളായ ബാക്ടീരിയകൾക്കെതിരെ സിംഗിൾ അയോൺ സിൽവറിനേക്കാൾ (Ag1+) കുറഞ്ഞ സാന്ദ്രതയിൽ ഓക്സിജൻ അടങ്ങിയ സിൽവർ ലവണങ്ങൾ കൂടുതൽ ഫലപ്രദമാണെന്ന് ഇൻ വിട്രോ പഠനങ്ങൾ തെളിയിച്ചിട്ടുണ്ട്. മറ്റൊരു പുതിയ തരം സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗിൽ അധിക ചേരുവകൾ ഉൾപ്പെടുന്നു, അതായത് എഥിലീനെഡിയാമിനെറ്റെട്രാഅസെറ്റിക് ആസിഡ് (EDTA), ബെൻസെത്തോണിയം ക്ലോറൈഡ് (BC), ഇവ ബയോഫിലിം ഇപിഎസിനെ ലക്ഷ്യം വയ്ക്കുകയും അതുവഴി ബയോഫിലിമിലേക്ക് വെള്ളിയുടെ നുഴഞ്ഞുകയറ്റം വർദ്ധിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു. മുറിവ് ബയോഫിലിമുകളെ ലക്ഷ്യം വയ്ക്കുന്നതിനുള്ള പുതിയ വഴികൾ ഈ പുതിയ സിൽവർ സാങ്കേതികവിദ്യകൾ വാഗ്ദാനം ചെയ്യുന്നു. എന്നിരുന്നാലും, മുറിവ് പരിസ്ഥിതിയിലും അണുബാധ-സ്വതന്ത്ര രോഗശാന്തിയിലും ഈ ആന്റിമൈക്രോബയലുകളുടെ സ്വാധീനം അവ പ്രതികൂലമായ മുറിവ് അന്തരീക്ഷം സൃഷ്ടിക്കുന്നില്ലെന്നും അല്ലെങ്കിൽ രോഗശാന്തി വൈകിപ്പിക്കുന്നില്ലെന്നും ഉറപ്പാക്കാൻ പ്രധാനമാണ്. നിരവധി സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗുകളിൽ ഇൻ വിട്രോ സിൽവർ സൈറ്റോടോക്സിസിറ്റിയെക്കുറിച്ചുള്ള ആശങ്കകൾ റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തിട്ടുണ്ട്10,11. എന്നിരുന്നാലും, ഇൻ വിട്രോ സൈറ്റോടോക്സിസിറ്റി ഇതുവരെ ഇൻ വിവോ വിഷബാധയിലേക്ക് വിവർത്തനം ചെയ്തിട്ടില്ല, കൂടാതെ നിരവധി Ag1+ ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ ഒരു നല്ല സുരക്ഷാ പ്രൊഫൈൽ പ്രകടമാക്കിയിട്ടുണ്ട്12.
ഇവിടെ, മുറിവുകളിലെ ബയോഫിലിമിനെതിരെ ഇൻ വിട്രോയിലും ഇൻ വിവോയിലും നൂതന സിൽവർ ഫോർമുലേഷനുകൾ അടങ്ങിയ കാർബോക്സിമീഥൈൽ സെല്ലുലോസ് ഡ്രെസ്സിംഗുകളുടെ ഫലപ്രാപ്തി ഞങ്ങൾ അന്വേഷിച്ചു. കൂടാതെ, അണുബാധ കൂടാതെ രോഗപ്രതിരോധ പ്രതികരണങ്ങളിലും രോഗശാന്തിയിലും ഈ ഡ്രെസ്സിംഗുകളുടെ ഫലങ്ങൾ വിലയിരുത്തി.
ഉപയോഗിച്ച എല്ലാ ഡ്രെസ്സിംഗുകളും വാണിജ്യപരമായി ലഭ്യമായിരുന്നു. 3M കെറാസെൽ ജെൽ ഫൈബർ ഡ്രസ്സിംഗ് (3M, നട്ട്സ്ഫോർഡ്, യുകെ) ഒരു നോൺ-ആന്റിമൈക്രോബയൽ 100% കാർബോക്സിമീതൈൽ സെല്ലുലോസ് (സിഎംസി) ജെൽ ഫൈബർ ഡ്രസ്സിംഗ് ആണ്, ഈ പഠനത്തിൽ നിയന്ത്രണ ഡ്രസ്സിംഗായി ഇത് ഉപയോഗിച്ചു. മൂന്ന് ആന്റിമൈക്രോബയൽ സിഎംസി സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ വിലയിരുത്തി, അതായത് 3M കെറാസെൽ എജി ഡ്രസ്സിംഗ് (3M, നട്ട്സ്ഫോർഡ്, യുകെ), ഇതിൽ 1.7 wt% അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു. ഉയർന്ന വാലൻസ് സിൽവർ അയോണുകളിൽ (Ag1+, Ag2+, Ag3+) ഓക്സിജൻ അടങ്ങിയ സിൽവർ ഉപ്പ് (Ag7NO11). Ag7NO11 ന്റെ വിഘടന സമയത്ത്, Ag1+, Ag2+, Ag3+ അയോണുകൾ 1:2:4 എന്ന അനുപാതത്തിൽ രൂപം കൊള്ളുന്നു. 1.2% സിൽവർ ക്ലോറൈഡ് (Ag1+) (ConvaTec, Deeside, UK) 13 അടങ്ങിയ അക്വാസെൽ Ag എക്സ്ട്രാ ഡ്രസ്സിംഗ്, 1.2% സിൽവർ ക്ലോറൈഡ് (Ag1+), EDTA, ബെൻസെത്തോണിയം ക്ലോറൈഡ് (ConvaTec, Deeside, UK) 14 അടങ്ങിയ അക്വാസെൽ Ag + എക്സ്ട്രാ ഡ്രസ്സിംഗ്.
ഈ പഠനത്തിൽ ഉപയോഗിച്ച സ്ട്രെയിനുകൾ സ്യൂഡോമോണസ് എരുഗിനോസ എൻ‌സി‌ടി‌സി 10781 (പബ്ലിക് ഹെൽത്ത് ഇംഗ്ലണ്ട്, സാലിസ്ബറി), സ്റ്റാഫൈലോകോക്കസ് ഓറിയസ് എൻ‌സി‌ടി‌സി 6571 (പബ്ലിക് ഹെൽത്ത് ഇംഗ്ലണ്ട്, സാലിസ്ബറി) എന്നിവയായിരുന്നു.
മുള്ളർ-ഹിന്റൺ ചാറിൽ (ഓക്സോയിഡ്, ആൾട്രിഞ്ചാം, യുകെ) ഒറ്റരാത്രികൊണ്ട് ബാക്ടീരിയകൾ വളർത്തി. പിന്നീട് മുള്ളർ-ഹിന്റൺ ചാറിൽ 1:100 എന്ന അനുപാതത്തിൽ 200 µl നേർപ്പിച്ച് അണുവിമുക്തമായ 0.2 µm വാട്ട്മാൻ സൈക്ലോപോർ മെംബ്രണുകളിൽ (വാട്ട്മാൻ പിഎൽസി, മെയ്ഡ്‌സ്റ്റോൺ, യുകെ) മുള്ളർ-ഹിന്റൺ അഗർ പ്ലേറ്റുകളിൽ (സിഗ്മ-ആൽഡ്രിച്ച് കമ്പനി ലിമിറ്റഡ്, കെന്റ്, ഗ്രേറ്റ് ബ്രിട്ടൻ) പൂശിച്ചു. 37°C താപനിലയിൽ 24 മണിക്കൂർ കൊളോണിയൽ ബയോഫിലിം രൂപീകരണം. ഈ കൊളോണിയൽ ബയോഫിലിമുകൾ ലോഗരിഥമിക് ചുരുങ്ങലിനായി പരീക്ഷിച്ചു.
ഡ്രസ്സിംഗ് 3 സെ.മീ2 ചതുരശ്ര കഷണങ്ങളായി മുറിച്ച് അണുവിമുക്തമായ ഡീയോണൈസ് ചെയ്ത വെള്ളത്തിൽ മുൻകൂട്ടി നനയ്ക്കുക. അഗർ പ്ലേറ്റിലെ കോളനിയുടെ ബയോഫിലിമിന് മുകളിൽ ബാൻഡേജ് വയ്ക്കുക. ഓരോ 24 ഹെക്ടർ ബയോഫിലിമും നീക്കം ചെയ്തു, ബയോഫിലിമിനുള്ളിലെ (CFU/ml) പ്രായോഗിക ബാക്ടീരിയകളെ ഡേ-ആംഗിൾ ന്യൂട്രലൈസേഷൻ ബ്രൂത്തിൽ (മെർക്ക്-മില്ലിപോർ) സീരിയൽ ഡൈല്യൂഷൻ (10−1 മുതൽ 10−7 വരെ) ഉപയോഗിച്ച് അളന്നു. 37°C-ൽ 24 മണിക്കൂർ ഇൻകുബേഷൻ ചെയ്ത ശേഷം, മുള്ളർ-ഹിന്റൺ അഗർ പ്ലേറ്റുകളിൽ സ്റ്റാൻഡേർഡ് പ്ലേറ്റ് കൗണ്ട് നടത്തി. ഓരോ ചികിത്സയും സമയ പോയിന്റും മൂന്നിരട്ടിയായി നടത്തി, ഓരോ നേർപ്പിക്കലിനും പ്ലേറ്റ് കൗണ്ട് ആവർത്തിച്ചു.
യൂറോപ്യൻ യൂണിയൻ കയറ്റുമതി മാനദണ്ഡങ്ങൾക്കനുസൃതമായി, കശാപ്പ് ചെയ്തതിന് 15 മിനിറ്റിനുള്ളിൽ പെൺ ലാർജ് വൈറ്റ് പന്നികളിൽ നിന്ന് പന്നിയിറച്ചിയുടെ വയറിന്റെ തൊലി ലഭിക്കും. തൊലി ഷേവ് ചെയ്ത് ആൽക്കഹോൾ വൈപ്പുകൾ ഉപയോഗിച്ച് വൃത്തിയാക്കി, തുടർന്ന് -80°C താപനിലയിൽ 24 മണിക്കൂർ ഫ്രീസ് ചെയ്ത് ചർമ്മത്തെ വികലമാക്കി. ഉരുകിയ ശേഷം, 1 സെ.മീ 2 തൊലി കഷണങ്ങൾ PBS, 0.6% സോഡിയം ഹൈപ്പോക്ലോറൈറ്റ്, 70% എത്തനോൾ എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് ഓരോ തവണയും 20 മിനിറ്റ് കഴുകി. എപ്പിഡെർമിസ് നീക്കം ചെയ്യുന്നതിനുമുമ്പ്, അണുവിമുക്തമായ PBS-ൽ 3 തവണ കഴുകി ബാക്കിയുള്ള എത്തനോൾ നീക്കം ചെയ്യുക. മുകളിൽ 0.45-μm കട്ടിയുള്ള നൈലോൺ മെംബ്രണും (മെർക്ക്-മില്ലിപോർ) 3 മില്ലി ഫീറ്റൽ ബോവിൻ സെറം (സിഗ്മ) അടങ്ങിയ 3 അബ്സോർബന്റ് പാഡുകളും (മെർക്ക്-മില്ലിപോർ) ഉപയോഗിച്ച് 6-കിണർ പ്ലേറ്റിൽ ചർമ്മം സംസ്കരിച്ചു, 10% ഡൽബെക്കോയുടെ മോഡിഫൈഡ് ഈഗിൾ ഉപയോഗിച്ച് സപ്ലിമെന്റ് ചെയ്തു. മീഡിയം (ഡൽബെക്കോയുടെ മോഡിഫൈഡ് ഈഗിൾ മീഡിയം - ആൽഡ്രിച്ച് ലിമിറ്റഡ്).
ബയോഫിലിം എക്സ്പോഷർ പഠനങ്ങൾക്കായി വിവരിച്ചതുപോലെ കൊളോണിയൽ ബയോഫിലിമുകൾ വളർത്തി. മെംബ്രണിലെ ബയോഫിലിം 72 മണിക്കൂർ കൾച്ചർ ചെയ്ത ശേഷം, ഒരു സ്റ്റെറൈൽ ഇനോക്കുലേഷൻ ലൂപ്പ് ഉപയോഗിച്ച് ബയോഫിലിം ചർമ്മത്തിന്റെ ഉപരിതലത്തിൽ പ്രയോഗിക്കുകയും മെംബ്രൺ നീക്കം ചെയ്യുകയും ചെയ്തു. ബയോഫിലിം പക്വത പ്രാപിക്കാനും പന്നിയുടെ ചർമ്മത്തിൽ പറ്റിനിൽക്കാനും അനുവദിക്കുന്നതിനായി ബയോഫിലിം 37°C താപനിലയിൽ 24 മണിക്കൂർ കൂടി പന്നിയുടെ ചർമ്മത്തിൽ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്തു. ബയോഫിലിം പാകമാവുകയും ഘടിപ്പിക്കുകയും ചെയ്ത ശേഷം, അണുവിമുക്തമായ വാറ്റിയെടുത്ത വെള്ളത്തിൽ മുൻകൂട്ടി നനച്ച 1.5 cm2 ഡ്രസ്സിംഗ് ചർമ്മത്തിന്റെ ഉപരിതലത്തിൽ നേരിട്ട് പ്രയോഗിക്കുകയും 37°C താപനിലയിൽ 24 മണിക്കൂർ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്യുകയും ചെയ്തു. പ്രെസ്റ്റോബ്ലൂ സെൽ വയബിലിറ്റി റിയാജന്റ് (ഇൻവിട്രോജൻ, ലൈഫ് ടെക്നോളജീസ്, പൈസ്ലി, യുകെ) ഓരോ എക്സ്പ്ലാന്റിന്റെയും അഗ്രഭാഗത്ത് ഏകീകൃതമായി പ്രയോഗിച്ച് 5 മിനിറ്റ് ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്തുകൊണ്ട് സ്റ്റെയിനിംഗ് വഴി പ്രവർത്തനക്ഷമമായ ബാക്ടീരിയകളെ ദൃശ്യവൽക്കരിച്ചു. ലൈക്ക MZ8 മൈക്രോസ്കോപ്പിൽ തൽക്ഷണം ചിത്രങ്ങൾ പകർത്താൻ ലൈക്ക DFC425 ഡിജിറ്റൽ ക്യാമറ ഉപയോഗിക്കുക. പിങ്ക് നിറമുള്ള പ്രദേശങ്ങൾ ഇമേജ് പ്രോ സോഫ്റ്റ്‌വെയർ പതിപ്പ് 10 (മീഡിയ സൈബർനെറ്റിക്സ് ഇൻക്, റോക്ക്‌വില്ലെ, എംഡി ഇമേജ്-പ്രോ (mediacy.com)) ഉപയോഗിച്ച് അളന്നു തിട്ടപ്പെടുത്തി. താഴെ വിവരിച്ചിരിക്കുന്നതുപോലെ സ്കാനിംഗ് ഇലക്ട്രോൺ മൈക്രോസ്കോപ്പി നടത്തി.
രാത്രിയിൽ വളർത്തിയ ബാക്ടീരിയകളെ മുള്ളർ-ഹിന്റൺ ചാറിൽ 1:100 എന്ന അനുപാതത്തിൽ നേർപ്പിച്ചു. അണുവിമുക്തമായ 0.2 μm വാട്ട്മാൻ സൈക്ലോപോർ മെംബ്രണിലേക്ക് (വാട്ട്മാൻ, മെയ്ഡ്‌സ്റ്റോൺ, യുകെ) 200 μl കൾച്ചർ ചേർത്ത് മുള്ളർ-ഹിന്റൺ അഗറിൽ പൂശിച്ചു. പക്വമായ ബയോഫിലിം രൂപീകരണം അനുവദിക്കുന്നതിനായി ബയോഫിലിം പ്ലേറ്റുകൾ 37°C താപനിലയിൽ 72 മണിക്കൂർ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്തു.
3 ദിവസത്തെ ബയോഫിലിം പക്വതയ്ക്ക് ശേഷം, 3 സെ.മീ 2 ചതുരശ്ര ബാൻഡേജ് നേരിട്ട് ബയോഫിലിമിൽ സ്ഥാപിക്കുകയും 37°C താപനിലയിൽ 24 മണിക്കൂർ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്യുകയും ചെയ്തു. ബയോഫിലിം പ്രതലത്തിൽ നിന്ന് ബാൻഡേജ് നീക്കം ചെയ്ത ശേഷം, ഓരോ ബയോഫിലിമിന്റെയും ഉപരിതലത്തിൽ 1 മില്ലി പ്രെസ്റ്റോബ്ലൂ സെൽ വയബിലിറ്റി റീജന്റ് (ഇൻവിട്രോജൻ, വാൾത്താം, എംഎ) 20 സെക്കൻഡ് നേരത്തേക്ക് ചേർത്തു. നിക്കോൺ ഡി 2300 ഡിജിറ്റൽ ക്യാമറ (നിക്കോൺ യുകെ ലിമിറ്റഡ്, കിംഗ്സ്റ്റൺ, യുകെ) ഉപയോഗിച്ച് നിറവ്യത്യാസങ്ങൾ രേഖപ്പെടുത്തുന്നതിന് മുമ്പ് പ്രതലങ്ങൾ ഉണക്കി.
മുള്ളർ-ഹിന്റൺ അഗറിൽ രാത്രികാല കൾച്ചറുകൾ തയ്യാറാക്കുക, വ്യക്തിഗത കോളനികളെ 10 മില്ലി മുള്ളർ-ഹിന്റൺ ചാറിലേക്ക് മാറ്റുക, 37°C (100 rpm) താപനിലയിൽ ഒരു ഷേക്കറിൽ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്യുക. രാത്രി മുഴുവൻ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്ത ശേഷം, കൾച്ചർ മുള്ളർ-ഹിന്റൺ ചാറിൽ 1:100 എന്ന അനുപാതത്തിൽ നേർപ്പിക്കുകയും 300 µl മുള്ളർ-ഹിന്റൺ അഗറിൽ 0.2 µm വൃത്താകൃതിയിലുള്ള വാട്ട്മാൻ സൈക്ലോപോർ മെംബ്രണിൽ (വാട്ട്മാൻ ഇന്റർനാഷണൽ, മെയ്ഡ്‌സ്റ്റോൺ, യുകെ) കണ്ടെത്തുകയും 72 മണിക്കൂറിനുള്ളിൽ 37°C താപനിലയിൽ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്യുകയും ചെയ്തു. താഴെ വിവരിച്ചിരിക്കുന്നതുപോലെ പക്വമായ ബയോഫിലിം മുറിവിൽ പ്രയോഗിച്ചു.
മൃഗങ്ങളുമായുള്ള എല്ലാ ജോലികളും മാഞ്ചസ്റ്റർ സർവകലാശാലയിൽ ഓഫീസ് ഓഫ് ആനിമൽ വെൽഫെയർ ആൻഡ് എത്തിക്കൽ റിവ്യൂ (P8721BD27) അംഗീകരിച്ച ഒരു പ്രോജക്റ്റ് ലൈസൻസിന് കീഴിലും 2012 ലെ പരിഷ്കരിച്ച ASPA പ്രകാരം ഹോം ഓഫീസ് പ്രസിദ്ധീകരിച്ച മാർഗ്ഗനിർദ്ദേശങ്ങൾക്കനുസൃതമായും നടത്തി. എല്ലാ രചയിതാക്കളും അറൈവൽ മാർഗ്ഗനിർദ്ദേശങ്ങൾ പാലിച്ചു. എട്ട് ആഴ്ച പ്രായമുള്ള C57BL/6j എലികളെ (എൻവിഗോ, ഓക്സൺ, യുകെ) എല്ലാ ഇൻ വിവോ പഠനങ്ങൾക്കും ഉപയോഗിച്ചു. ഐസോഫ്ലൂറേൻ (പിരമൽ ക്രിട്ടിക്കൽ കെയർ ലിമിറ്റഡ്, വെസ്റ്റ് ഡ്രെയ്‌ടൺ, യുകെ) ഉപയോഗിച്ച് എലികൾക്ക് അനസ്തേഷ്യ നൽകി, അവയുടെ ഡോർസൽ പ്രതലങ്ങൾ ഷേവ് ചെയ്ത് വൃത്തിയാക്കി. തുടർന്ന് ഓരോ എലിക്കും സ്റ്റീഫൽ ബയോപ്സി പഞ്ച് (ഷുക്കോ ഇന്റർനാഷണൽ, ഹെർട്ട്‌ഫോർഡ്‌ഷയർ, യുകെ) ഉപയോഗിച്ച് 2 × 6 മില്ലീമീറ്റർ വലിപ്പമുള്ള ഒരു എക്‌സിഷണൽ മുറിവ് നൽകി. ബയോഫിലിം ബാധിച്ച മുറിവുകൾക്ക്, മുകളിൽ വിവരിച്ചതുപോലെ മെംബ്രണിൽ വളർത്തിയ 72 മണിക്കൂർ കൊളോണിയൽ ബയോഫിലിം, പരിക്കേറ്റ ഉടൻ തന്നെ ഒരു സ്റ്റെറൈൽ ഇനോക്കുലേഷൻ ലൂപ്പ് ഉപയോഗിച്ച് മുറിവിന്റെ ചർമ്മ പാളിയിൽ പുരട്ടുക, മെംബ്രൺ ഉപേക്ഷിക്കുക. മുറിവിന്റെ ഈർപ്പമുള്ള അന്തരീക്ഷം നിലനിർത്താൻ ഒരു ചതുരശ്ര സെന്റിമീറ്റർ ഡ്രസ്സിംഗ് അണുവിമുക്തമായ വെള്ളത്തിൽ മുൻകൂട്ടി നനയ്ക്കുന്നു. ഓരോ മുറിവിലും ഡ്രസ്സിംഗ് നേരിട്ട് പുരട്ടുകയും അധിക പശ നൽകുന്നതിനായി അരികുകളിൽ 3M ടെഗാഡെർം ഫിലിം (3M, ബ്രാക്ക്നെൽ, യുകെ), മാസ്റ്റിസോൾ ദ്രാവക പശ (എലോക്വസ്റ്റ് ഹെൽത്ത്കെയർ, ഫെർൻഡേൽ, എംഐ) എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് മൂടുകയും ചെയ്തു. ബ്യൂപ്രെനോർഫിൻ (അനിമൽകെയർ, യോർക്ക്, യുകെ) 0.1 മില്ലിഗ്രാം/കിലോഗ്രാം സാന്ദ്രതയിൽ ഒരു വേദനസംഹാരിയായി നൽകി. ഷെഡ്യൂൾ 1 രീതി ഉപയോഗിച്ച് പരിക്കേറ്റതിന് മൂന്ന് ദിവസത്തിന് ശേഷം എലികളെ കൊല്ലുക, ആവശ്യാനുസരണം മുറിവ് നീക്കം ചെയ്യുക, പകുതിയാക്കുക, സംഭരിക്കുക.
നിർമ്മാതാവിന്റെ പ്രോട്ടോക്കോൾ അനുസരിച്ച് ഹെമറ്റോക്സിലിൻ (തെർമോഫിഷർ സയന്റിഫിക്), ഇയോസിൻ (തെർമോഫിഷർ സയന്റിഫിക്) സ്റ്റെയിനിംഗ് നടത്തി. ഇമേജ് പ്രോ സോഫ്റ്റ്‌വെയർ പതിപ്പ് 10 (മീഡിയ സൈബർനെറ്റിക്സ് ഇൻക്, റോക്ക്‌വില്ലെ, എംഡി) ഉപയോഗിച്ച് മുറിവ് പ്രദേശവും റീഎപിത്തീലിയലൈസേഷനും അളന്നു.
ടിഷ്യു ഭാഗങ്ങൾ സൈലീനിൽ (തെർമോഫിഷർ സയന്റിഫിക്, ലൗബറോ, യുകെ) ഡീവാക്സ് ചെയ്തു, 100–50% ഗ്രേഡഡ് എത്തനോൾ ഉപയോഗിച്ച് വീണ്ടും ജലാംശം നൽകി, ഡീയോണൈസ് ചെയ്ത വെള്ളത്തിൽ (തെർമോഫിഷർ സയന്റിഫിക്) ഹ്രസ്വമായി മുക്കി. നിർമ്മാതാവിന്റെ പ്രോട്ടോക്കോൾ അനുസരിച്ച് വെക്റ്റസ്റ്റെയിൻ എലൈറ്റ് എബിസി പികെ-6104 കിറ്റ് (വെക്റ്റർ ലബോറട്ടറീസ്, ബർലിംഗാം, സിഎ) ഉപയോഗിച്ചാണ് ഇമ്മ്യൂണോഹിസ്റ്റോകെമിസ്ട്രി നടത്തിയത്. ന്യൂട്രോഫില്ലുകൾ NIMP-R14 (തെർമോഫിഷർ സയന്റിഫിക്), മാക്രോഫേജുകൾ Ms CD107b പ്യുവർ M3/84 (ബിഡി ബയോസയൻസസ്, വോക്കിംഗ്ഹാം, യുകെ) എന്നിവയിലേക്കുള്ള പ്രാഥമിക ആന്റിബോഡികൾ ബ്ലോക്കിംഗ് ലായനിയിൽ 1:100 എന്ന അനുപാതത്തിൽ നേർപ്പിച്ച് മുറിച്ച പ്രതലത്തിൽ ചേർത്തു, തുടർന്ന് 2 ആന്റിബോഡികൾ ആന്റി-, വെക്റ്റസ്റ്റെയിൻ എബിസി, വെക്റ്റർ നോവ റെഡ് പെറോക്സിഡേസ് (എച്ച്ആർപി) സബ്‌സ്‌ട്രേറ്റ് കിറ്റ് (വെക്റ്റർ ലബോറട്ടറീസ്, ബർലിംഗാം, സിഎ) എന്നിവ ചേർത്ത് ഹെമറ്റോക്‌സിലിൻ ഉപയോഗിച്ച് കൗണ്ടർസ്റ്റെയിൻ ചെയ്തു. ഒളിമ്പസ് BX43 മൈക്രോസ്കോപ്പും ഒളിമ്പസ് DP73 ഡിജിറ്റൽ ക്യാമറയും (ഒളിമ്പസ്, സൗത്ത്എൻഡ്-ഓൺ-സീ, യുകെ) ഉപയോഗിച്ചാണ് ചിത്രങ്ങൾ എടുത്തത്.
2.5% ഗ്ലൂട്ടറാൾഡിഹൈഡിലും 4% ഫോർമാൽഡിഹൈഡിലും 0.1 M HEPES (pH 7.4) ൽ 4°C താപനിലയിൽ 24 മണിക്കൂർ ചർമ്മ സാമ്പിളുകൾ ഉറപ്പിച്ചു. ഗ്രേഡഡ് എത്തനോൾ ഉപയോഗിച്ച് സാമ്പിളുകൾ നിർജ്ജലീകരണം ചെയ്യുകയും ക്വാറം K850 ക്രിട്ടിക്കൽ പോയിന്റ് ഡ്രയർ (ക്വാറം ടെക്നോളജീസ് ലിമിറ്റഡ്, ലൗട്ടൺ, യുകെ) ഉപയോഗിച്ച് CO2 ൽ ഉണക്കുകയും ക്വാറം SC7620 മിനി സ്പട്ടറർ/ഗ്ലോ ഡിസ്ചാർജ് സിസ്റ്റം ഉപയോഗിച്ച് സ്വർണ്ണ-പല്ലാഡിയം അലോയ് ഉപയോഗിച്ച് സ്പട്ടർ പൂശുകയും ചെയ്തു. മുറിവിന്റെ മധ്യഭാഗം ദൃശ്യവൽക്കരിക്കുന്നതിന് FEI ക്വാണ്ട 250 സ്കാനിംഗ് ഇലക്ട്രോൺ മൈക്രോസ്കോപ്പ് (തെർമോഫിഷർ സയന്റിഫിക്) ഉപയോഗിച്ച് മാതൃകകൾ ചിത്രീകരിച്ചു.
നീക്കം ചെയ്ത എലിയുടെ മുറിവിന്റെ പ്രതലത്തിൽ ടോട്ടോ-1 അയഡൈഡ് (2 μM) പ്രയോഗിച്ച് 37 °C (തെർമോഫിഷർ സയന്റിഫിക്) താപനിലയിൽ 5 മിനിറ്റ് ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്തു, 37 °C (തെർമോഫിഷർ സയന്റിഫിക്) താപനിലയിൽ സൈറ്റോ-60 (10 μM) ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിച്ചു. ലെയ്ക ടിസിഎസ് എസ്പി8 ഉപയോഗിച്ച് 15 മിനിറ്റ് ദൈർഘ്യമുള്ള ഇസഡ്-സ്റ്റാക്ക് ചിത്രങ്ങൾ സൃഷ്ടിച്ചു.
ഗ്രാഫ്പാഡ് പ്രിസം V9 സോഫ്റ്റ്‌വെയർ (ഗ്രാഫ്പാഡ് സോഫ്റ്റ്‌വെയർ, ലാ ജോല്ല, CA) ഉപയോഗിച്ച് ബയോളജിക്കൽ, ടെക്നിക്കൽ റെപ്ലിക്കേറ്റ് ഡാറ്റ പട്ടികപ്പെടുത്തി വിശകലനം ചെയ്തു. ഡണറ്റിന്റെ പോസ്റ്റ് ഹോക്ക് ടെസ്റ്റ് ഉപയോഗിച്ച് ഒന്നിലധികം താരതമ്യങ്ങൾ ഉപയോഗിച്ച് വേരിയൻസിന്റെ വൺ-വേ വിശകലനം ഉപയോഗിച്ച് ഓരോ ചികിത്സയും നോൺ-ആന്റിമൈക്രോബയൽ കൺട്രോൾ ഡ്രസ്സിംഗും തമ്മിലുള്ള വ്യത്യാസങ്ങൾ പരിശോധിച്ചു. <0.05 എന്ന പി മൂല്യം പ്രധാനമായി കണക്കാക്കി.
സ്റ്റാഫൈലോകോക്കസ് ഓറിയസ്, സ്യൂഡോമോണസ് എരുഗിനോസ ഇൻ വിട്രോ എന്നിവയുടെ ബയോഫിലിം കോളനികൾക്കെതിരെയാണ് സിൽവർ ജെൽ ഫൈബ്രസ് ഡ്രെസ്സിംഗുകളുടെ ഫലപ്രാപ്തി ആദ്യം വിലയിരുത്തിയത്. സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗുകളിൽ വെള്ളിയുടെ വ്യത്യസ്ത ഫോർമുലകൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു: പരമ്പരാഗത സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ Ag1+ അയോണുകൾ ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്നു; EDTA/BC ചേർത്തതിനുശേഷം Ag1+ അയോണുകൾ ഉത്പാദിപ്പിക്കാൻ കഴിയുന്ന സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗുകൾക്ക് ബയോഫിലിം മാട്രിക്സിനെ നശിപ്പിക്കാനും വെള്ളിയുടെ ആൻറി ബാക്ടീരിയൽ പ്രഭാവത്തിന് കീഴിൽ ബാക്ടീരിയകളെ വെള്ളിയിലേക്ക് തുറന്നുകാട്ടാനും കഴിയും. അയോണുകൾ15 ഉം Ag1+, Ag2+, Ag3+ അയോണുകൾ ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്ന ഓക്സിജൻ അടങ്ങിയ Ag ലവണങ്ങൾ അടങ്ങിയ ഡ്രെസ്സിംഗുകളും. ജെൽ ചെയ്ത നാരുകളിൽ നിന്ന് നിർമ്മിച്ച ഒരു നോൺ-ആന്റിമൈക്രോബയൽ കൺട്രോൾ ഡ്രസ്സിംഗുമായി ഇതിന്റെ ഫലപ്രാപ്തി താരതമ്യം ചെയ്തു. ബയോഫിലിമിനുള്ളിൽ ശേഷിക്കുന്ന പ്രവർത്തനക്ഷമമായ ബാക്ടീരിയകളെ ഓരോ 24 മണിക്കൂറിലും 8 ദിവസത്തേക്ക് വിലയിരുത്തി (ചിത്രം 1). 5-ാം ദിവസം, ബയോഫിലിം 3.85 × 105S ഉപയോഗിച്ച് വീണ്ടും കുത്തിവച്ചു. സ്റ്റാഫൈലോകോക്കസ് ഓറിയസ് അല്ലെങ്കിൽ 1.22×105P. ബയോഫിലിം വീണ്ടെടുക്കൽ വിലയിരുത്താൻ എരുഗിനോസ. ആന്റിമൈക്രോബയൽ നിയന്ത്രണ ഡ്രെസ്സിംഗുകളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, സ്റ്റാഫൈലോകോക്കസ് ഓറിയസ്, സ്യൂഡോമോണസ് എരുഗിനോസ ബയോഫിലിമുകളിൽ 5 ദിവസത്തിനുള്ളിൽ ബാക്ടീരിയയുടെ പ്രവർത്തനക്ഷമതയെ Ag1+ ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ വളരെ കുറച്ച് മാത്രമേ സ്വാധീനിച്ചിട്ടുള്ളൂ. ഇതിനു വിപരീതമായി, ഓക്സിജൻ അടങ്ങിയ Ag, Ag1+ + EDTA/BC ലവണങ്ങൾ അടങ്ങിയ ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ 5 ദിവസത്തിനുള്ളിൽ ബയോഫിലിമിനുള്ളിലെ ബാക്ടീരിയകളെ കൊല്ലുന്നതിൽ ഫലപ്രദമാണ്. 5-ാം ദിവസം പ്ലാങ്ക്ടോണിക് ബാക്ടീരിയ ഉപയോഗിച്ച് ആവർത്തിച്ചുള്ള കുത്തിവയ്പ്പിന് ശേഷം, ബയോഫിലിമിന്റെ പുനഃസ്ഥാപനം നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടില്ല (ചിത്രം 1).
സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ ഉപയോഗിച്ചുള്ള ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷം സ്റ്റാഫൈലോകോക്കസ് ഓറിയസ്, സ്യൂഡോമോണസ് എരുഗിനോസ ബയോഫിലിമുകളിലെ പ്രായോഗിക ബാക്ടീരിയകളുടെ അളവ് നിർണ്ണയിക്കൽ. സ്റ്റാഫൈലോകോക്കസ് ഓറിയസ്, സ്യൂഡോമോണസ് എരുഗിനോസ എന്നിവയുടെ ബയോഫിലിം കോളനികളെ സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ അല്ലെങ്കിൽ ആന്റിമൈക്രോബയൽ അല്ലാത്ത നിയന്ത്രണ ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിച്ചു, ശേഷിക്കുന്ന പ്രായോഗിക ബാക്ടീരിയകളുടെ എണ്ണം ഓരോ 24 മണിക്കൂറിലും നിർണ്ണയിക്കപ്പെട്ടു. 5 ദിവസത്തിനുശേഷം, ബയോഫിലിം 3.85×105S ഉപയോഗിച്ച് വീണ്ടും കുത്തിവച്ചു. സ്റ്റാഫൈലോകോക്കസ് ഓറിയസ് അല്ലെങ്കിൽ 1.22×105P. ബയോഫിലിം വീണ്ടെടുക്കൽ വിലയിരുത്തുന്നതിനായി ബാക്ടീരിയോപ്ലാങ്ക്ടൺ സ്യൂഡോമോണസ് എരുഗിനോസയുടെ കോളനികൾ വ്യക്തിഗതമായി രൂപപ്പെടുത്തി. ഗ്രാഫുകൾ ശരാശരി +/- സ്റ്റാൻഡേർഡ് പിശക് കാണിക്കുന്നു.
ബയോഫിലിം പ്രവർത്തനക്ഷമതയിൽ വെള്ളി ഡ്രെസ്സിംഗുകളുടെ സ്വാധീനം ദൃശ്യവൽക്കരിക്കുന്നതിന്, പന്നിയിറച്ചി ചർമ്മത്തിൽ വളർത്തിയ പക്വമായ ബയോഫിലിമുകളിൽ ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ പ്രയോഗിച്ചു. 24 മണിക്കൂറിനുശേഷം, ഡ്രെസ്സിംഗ് നീക്കം ചെയ്യുകയും ബയോഫിലിമിൽ ഒരു നീല റിയാക്ടീവ് ഡൈ ഉപയോഗിച്ച് സ്റ്റെയിൻ ചെയ്യുകയും ചെയ്യുന്നു, ഇത് ജീവനുള്ള ബാക്ടീരിയകളാൽ പിങ്ക് നിറത്തിലേക്ക് മെറ്റബോളിസീകരിക്കപ്പെടുന്നു. കൺട്രോൾ ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിച്ച ബയോഫിലിമുകൾ പിങ്ക് നിറത്തിലായിരുന്നു, ഇത് ബയോഫിലിമിനുള്ളിൽ പ്രായോഗിക ബാക്ടീരിയകളുടെ സാന്നിധ്യം സൂചിപ്പിക്കുന്നു (ചിത്രം 2A). ഇതിനു വിപരീതമായി, Ag ഓക്സിസോൾസ് ഡ്രെസ്സിംഗ് ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിച്ച ബയോഫിലിം പ്രാഥമികമായി നീലയായിരുന്നു, ഇത് പന്നിയുടെ ചർമ്മത്തിന്റെ ഉപരിതലത്തിൽ ശേഷിക്കുന്ന ബാക്ടീരിയകൾ പ്രവർത്തനക്ഷമമല്ലാത്ത ബാക്ടീരിയകളാണെന്ന് സൂചിപ്പിക്കുന്നു (ചിത്രം 2B). Ag1+ അടങ്ങിയ ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിച്ച ബയോഫിലിമുകളിൽ നീലയും പിങ്ക് നിറവും കലർന്ന നിറം നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടു, ഇത് ബയോഫിലിമിനുള്ളിൽ പ്രായോഗികവും പ്രവർത്തനക്ഷമമല്ലാത്തതുമായ ബാക്ടീരിയകളുടെ സാന്നിധ്യം സൂചിപ്പിക്കുന്നു (ചിത്രം 2C), അതേസമയം Ag1+ അടങ്ങിയ EDTA/BC ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ പ്രധാനമായും നീലയായിരുന്നു, ചില പിങ്ക് പാടുകൾ ഉണ്ടായിരുന്നു. വെള്ളി ഡ്രെസ്സിംഗ് ബാധിക്കാത്ത പ്രദേശങ്ങൾ സൂചിപ്പിക്കുന്നു (ചിത്രം 2D). സജീവ (പിങ്ക്) ഉം നിഷ്ക്രിയ (നീല) ഉം ഭാഗങ്ങൾ അളക്കുമ്പോൾ നിയന്ത്രണ പാച്ച് 75% സജീവമാണെന്ന് കണ്ടെത്തി (ചിത്രം 2E). Ag1+ + EDTA/BC ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ ഓക്സിജൻ അടങ്ങിയ Ag ഉപ്പ് ഡ്രെസ്സിംഗുകൾക്ക് സമാനമായി നടത്തി, യഥാക്രമം 13% ഉം 14% ഉം അതിജീവന നിരക്ക്. Ag1+ ഡ്രെസ്സിംഗും ബാക്ടീരിയയുടെ പ്രവർത്തനക്ഷമത 21% കുറച്ചു. സ്കാനിംഗ് ഇലക്ട്രോൺ മൈക്രോസ്കോപ്പി (SEM) ഉപയോഗിച്ച് ഈ ബയോഫിലിമുകൾ നിരീക്ഷിച്ചു. കൺട്രോൾ ഡ്രസ്സിംഗും Ag1+ ഡ്രെസ്സിംഗും ഉപയോഗിച്ചുള്ള ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷം, പന്നിയിറച്ചി ചർമ്മത്തെ മൂടുന്ന സ്യൂഡോമോണസ് എരുഗിനോസയുടെ ഒരു പാളി നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടു (ചിത്രം 2F,H), അതേസമയം Ag1+ ഡ്രെസ്സിംഗിന്റെ ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷം, കുറച്ച് ബാക്ടീരിയൽ കോശങ്ങളും അടിയിൽ കുറച്ച് ബാക്ടീരിയൽ കോശങ്ങളും കണ്ടെത്തി. കൊളാജൻ നാരുകൾ പന്നിയിറച്ചി ചർമ്മത്തിന്റെ ടിഷ്യു ഘടനയായി കണക്കാക്കാം (ചിത്രം 2G). Ag1+ + EDTA/BC ഡ്രെസ്സിംഗുമായുള്ള ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷം, ബാക്ടീരിയൽ പ്ലാക്കുകളും അടിസ്ഥാന കൊളാജൻ ഫൈബർ പ്ലാക്കുകളും ദൃശ്യമായിരുന്നു (ചിത്രം 2I).
സിൽവർ ഡ്രസ്സിംഗ് ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷം സ്യൂഡോമോണസ് എരുഗിനോസ ബയോഫിലിമിന്റെ ദൃശ്യവൽക്കരണം. (എ–ഡി) സിൽവർ ഡ്രസ്സിംഗ് അല്ലെങ്കിൽ നോൺ-ആന്റിമൈക്രോബയൽ കൺട്രോൾ ഡ്രസ്സിംഗ് ഉപയോഗിച്ചുള്ള ചികിത്സയ്ക്ക് 24 മണിക്കൂർ കഴിഞ്ഞ് പ്രെസ്റ്റോബ്ലൂ വയാബിലിറ്റി ഡൈ ഉപയോഗിച്ച് പന്നി ചർമ്മത്തിൽ വളർത്തിയ സ്യൂഡോമോണസ് എരുഗിനോസ ബയോഫിലിമുകളിലെ ബാക്ടീരിയ വയാബിലിറ്റി ദൃശ്യവൽക്കരിച്ചു. ജീവനുള്ള ബാക്ടീരിയകൾ പിങ്ക് നിറമാണ്, വയാബിലിറ്റിയില്ലാത്ത ബാക്ടീരിയകളും പന്നിയുടെ തൊലിയും നീലയാണ്. (ഇ) സ്കാനിംഗ് ഇലക്ട്രോൺ മൈക്രോസ്കോപ്പി ഇമേജ് പ്രോ പതിപ്പ് 10 (FI) ഉപയോഗിച്ച് പന്നി ചർമ്മത്തിൽ (പിങ്ക് സ്പോട്ട്) വളർത്തിയ സ്യൂഡോമോണസ് എരുഗിനോസ ബയോഫിലിമുകളുടെ അളവ് നിർണ്ണയിക്കൽ, 24 മണിക്കൂർ സിൽവർ ഡ്രസ്സിംഗ് അല്ലെങ്കിൽ നോൺ-ആന്റിമൈക്രോബയൽ കൺട്രോൾ ഡ്രസ്സിംഗ് ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിച്ചു. SEM സ്കെയിൽ ബാർ = 5 µm. (ജെ–എം) കൊളോണിയൽ ബയോഫിലിമുകൾ ഫിൽട്ടറുകളിൽ വളരുകയും സിൽവർ ഡ്രസ്സിംഗ് ഉപയോഗിച്ച് 24 മണിക്കൂർ ഇൻകുബേഷനുശേഷം പ്രെസ്റ്റോബ്ലൂ റിയാക്ടീവ് ഡൈ ഉപയോഗിച്ച് സ്റ്റെയിൻ ചെയ്യുകയും ചെയ്തു.
ഡ്രെസ്സിംഗുകളും ബയോഫിലിമുകളും തമ്മിലുള്ള അടുത്ത സമ്പർക്കം ഡ്രെസ്സിംഗുകളുടെ ഫലപ്രാപ്തിയെ ബാധിച്ചിട്ടുണ്ടോ എന്ന് നിർണ്ണയിക്കാൻ, പരന്ന പ്രതലത്തിൽ സ്ഥാപിച്ച കൊളോണിയൽ ബയോഫിലിമുകൾ 24 മണിക്കൂർ ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ ഉപയോഗിച്ച് പ്രോസസ്സ് ചെയ്യുകയും തുടർന്ന് റിയാക്ടീവ് ഡൈകൾ ഉപയോഗിച്ച് സ്റ്റെയിൻ ചെയ്യുകയും ചെയ്തു. ചികിത്സിക്കാത്ത ബയോഫിലിം കടും പിങ്ക് നിറത്തിലായിരുന്നു (ചിത്രം 2J). ഓക്സിജൻ അടങ്ങിയ Ag ലവണങ്ങൾ അടങ്ങിയ ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ ഉപയോഗിച്ച് പ്രോസസ്സ് ചെയ്ത ബയോഫിലിമുകളിൽ നിന്ന് വ്യത്യസ്തമായി (ചിത്രം 2K), Ag1+ അല്ലെങ്കിൽ Ag1+ + EDTA/BC അടങ്ങിയ ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ ഉപയോഗിച്ച് പ്രോസസ്സ് ചെയ്ത ബയോഫിലിമുകളിൽ പിങ്ക് സ്റ്റെയിനിംഗ് ബാൻഡുകൾ കാണിച്ചു (ചിത്രം 2L,M). ഈ പിങ്ക് നിറം പ്രായോഗിക ബാക്ടീരിയകളുടെ സാന്നിധ്യം സൂചിപ്പിക്കുന്നു, കൂടാതെ ഡ്രസ്സിംഗിനുള്ളിലെ തുന്നൽ പ്രദേശവുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു. ഈ തുന്നൽ പ്രദേശങ്ങൾ ബയോഫിലിമിനുള്ളിലെ ബാക്ടീരിയകളെ അതിജീവിക്കാൻ അനുവദിക്കുന്ന നിർജ്ജീവ ഇടങ്ങൾ സൃഷ്ടിക്കുന്നു.
ഇൻ വിവോയിൽ സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗുകളുടെ ഫലപ്രാപ്തി വിലയിരുത്തുന്നതിന്, മുതിർന്ന എസ്. ഓറിയസ്, പി. എരുഗിനോസ ബയോഫിലിമുകൾ ബാധിച്ച എലികളുടെ പൂർണ്ണ കട്ടിയുള്ള മുറിവുകൾ നീക്കം ചെയ്തു, ആന്റിമൈക്രോബയൽ നിയന്ത്രണ ഡ്രെസ്സിംഗുകളോ സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗുകളോ ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിച്ചു. 3 ദിവസത്തെ ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷം, മാക്രോസ്കോപ്പിക് ഇമേജ് വിശകലനത്തിൽ ഓക്സിജൻ അടങ്ങിയ ഉപ്പ് ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിക്കുമ്പോൾ ആന്റിമൈക്രോബയൽ നിയന്ത്രണ ഡ്രെസ്സിംഗുകളുമായും മറ്റ് സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗുകളുമായും താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ ചെറിയ മുറിവുകളുടെ വലുപ്പങ്ങൾ കാണിച്ചു (ചിത്രം 3A-H). ഈ നിരീക്ഷണങ്ങൾ സ്ഥിരീകരിക്കുന്നതിന്, മുറിവുകൾ വിളവെടുക്കുകയും ഇമേജ് പ്രോ സോഫ്റ്റ്‌വെയർ പതിപ്പ് 10 (ചിത്രം 3I-L) ഉപയോഗിച്ച് ഹെമറ്റോക്‌സിലിൻ, ഇയോസിൻ-സ്റ്റെയിൻ ചെയ്ത ടിഷ്യു വിഭാഗങ്ങളിൽ മുറിവുകളുടെ വിസ്തൃതിയും റീഎപിത്തീലിയലൈസേഷനും അളക്കുകയും ചെയ്തു.
മുറിവിന്റെ ഉപരിതലത്തിൽ വെള്ളി ഡ്രെസ്സിംഗിന്റെ സ്വാധീനവും ബയോഫിലിമുകൾ ബാധിച്ച മുറിവുകളുടെ റീ-എപ്പിത്തീലിയലൈസേഷനും. (A–H) ആന്റിമൈക്രോബയൽ നിയന്ത്രണ ഡ്രസ്സിംഗ്, ഓക്സിജൻ അടങ്ങിയ Ag ഉപ്പ് ഡ്രസ്സിംഗ്, Ag1+ ഡ്രസ്സിംഗ്, Ag1+ ഡ്രസ്സിംഗ് എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് മൂന്ന് ദിവസത്തെ ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷം സ്യൂഡോമോണസ് എരുഗിനോസ (A–D), സ്റ്റാഫൈലോകോക്കസ് ഓറിയസ് (E–H) എന്നിവയുടെ ബയോഫിലിമുകൾ ബാധിച്ച ചെറിയ കോശങ്ങൾ. പ്രതിനിധി മാക്രോസ്കോപ്പിക് ചിത്രങ്ങൾ. Ag1+ + EDTA/BC ഡ്രസ്സിംഗ് ഉള്ള എലികളുടെ മുറിവുകൾ. (IL) പ്രതിനിധി സ്യൂഡോമോണസ് എരുഗിനോസ അണുബാധ, ഹെമറ്റോക്സിലിൻ, ഇയോസിൻ എന്നിവയാൽ കറ പുരണ്ട ഹിസ്റ്റോളജിക്കൽ ഭാഗങ്ങൾ, മുറിവിന്റെ വിസ്തൃതിയും എപ്പിത്തീലിയൽ പുനരുജ്ജീവനവും അളക്കാൻ ഉപയോഗിക്കുന്നു. മുറിവിന്റെ വിസ്തൃതിയുടെ അളവ് (M, O) യും സ്യൂഡോമോണസ് എരുഗിനോസ (M, N), സ്റ്റാഫൈലോകോക്കസ് ഓറിയസ് (O, P) ബയോഫിലിമുകളുടെ ശതമാനം റീപിത്തീലിയലൈസേഷനും (N, P) (ചികിത്സാ ഗ്രൂപ്പിൽ n = 12). ഗ്രാഫുകൾ ശരാശരി +/- സ്റ്റാൻഡേർഡ് പിശക് കാണിക്കുന്നു. * എന്നാൽ p = < 0.05 ** എന്നാൽ p = < 0.01; മാക്രോസ്കോപ്പിക് സ്കെയിൽ = 2.5 മിമി, ഹിസ്റ്റോളജിക്കൽ സ്കെയിൽ = 500 µm.
സ്യൂഡോമോണസ് എരുഗിനോസ ബയോഫിലിം ബാധിച്ച മുറിവുകളിലെ മുറിവിന്റെ ഭാഗത്തിന്റെ അളവ് (ചിത്രം 3M) കാണിക്കുന്നത് Ag ഓക്സിസാൾട്ടുകൾ ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിച്ച മുറിവുകളുടെ ശരാശരി മുറിവിന്റെ വലുപ്പം 2.5 mm2 ആണെന്നും, ആന്റിമൈക്രോബയൽ അല്ലാത്ത നിയന്ത്രണ ഡ്രസ്സിംഗിന് ശരാശരി മുറിവിന്റെ വലുപ്പം 3.1 mm2 ആണെന്നും, ഇത് ശരിയല്ല. സ്ഥിതിവിവരക്കണക്ക് പ്രാധാന്യത്തിലെത്തി (ചിത്രം 3M). p = 0.423). Ag1+ അല്ലെങ്കിൽ Ag1+ + EDTA/BC ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിച്ച മുറിവുകളുടെ വിസ്തൃതിയിൽ (യഥാക്രമം 3.1 mm2 ഉം 3.6 mm2 ഉം) കുറവൊന്നും കാണിച്ചില്ല. ഓക്സിജൻ അടങ്ങിയ Ag ഉപ്പ് ഡ്രസ്സിംഗ് ഉപയോഗിച്ചുള്ള ചികിത്സ ആന്റിമൈക്രോബയൽ അല്ലാത്ത നിയന്ത്രണ ഡ്രസ്സിംഗ് (യഥാക്രമം 34% ഉം 15% ഉം; p = 0.029) ഉം Ag1+ അല്ലെങ്കിൽ Ag1+ + EDTA/BC (10% ഉം 11%) ഉം (ചിത്രം 3N) ഉം വലിയ അളവിൽ റീ-എപ്പിത്തീലിയലൈസേഷനെ പ്രോത്സാഹിപ്പിച്ചു. . , യഥാക്രമം).
S. aureus ബയോഫിലിമുകൾ ബാധിച്ച മുറിവുകളിലും മുറിവിന്റെ വിസ്തൃതിയിലും എപ്പിത്തീലിയൽ പുനരുജ്ജീവനത്തിലും സമാനമായ പ്രവണതകൾ നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടു (ചിത്രം 3O). നിയന്ത്രണ നോൺ-ആന്റിമൈക്രോബയൽ ഡ്രസ്സിംഗുമായി (2.6 mm2) താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ ഓക്സിജൻ അടങ്ങിയ സിൽവർ ലവണങ്ങൾ അടങ്ങിയ ഡ്രസ്സിംഗുകൾ മുറിവിന്റെ വിസ്തൃതി (2.0 mm2) 23% കുറച്ചു, എന്നിരുന്നാലും ഈ കുറവ് കാര്യമായിരുന്നില്ല (p = 0.304) (ചിത്രം 3O). കൂടാതെ, Ag1+ ചികിത്സാ ഗ്രൂപ്പിലെ മുറിവിന്റെ വിസ്തൃതി ചെറുതായി കുറഞ്ഞു (2.4 mm2), അതേസമയം Ag1+ + EDTA/BC ഡ്രസ്സിംഗ് ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിച്ച മുറിവ് മുറിവിന്റെ വിസ്തൃതി (2.9 mm2) കുറച്ചില്ല. ആന്റിമൈക്രോബയൽ അല്ലാത്ത കൺട്രോൾ ഡ്രസ്സിംഗുകൾ ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിച്ചതിനേക്കാൾ വലിയ അളവിൽ S. aureus ബയോഫിലിം (31%) ബാധിച്ച മുറിവുകളുടെ റീ-എപ്പിത്തീലിയലൈസേഷനും Ag യുടെ ഓക്സിജൻ ലവണങ്ങൾ പ്രോത്സാഹിപ്പിച്ചു (12%, p = 0.003) (ചിത്രം 3P). Ag1+ ഡ്രസ്സിംഗ് (16%, p = 0.903), Ag+1 + EDTA/BC ഡ്രസ്സിംഗ് (14%, p = 0.965) എന്നിവ നിയന്ത്രണത്തിന് സമാനമായ എപ്പിത്തീലിയൽ പുനരുജ്ജീവനത്തിന്റെ അളവ് കാണിച്ചു.
ബയോഫിലിം മാട്രിക്സിൽ സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗുകളുടെ പ്രഭാവം ദൃശ്യവൽക്കരിക്കുന്നതിന്, ടോട്ടോ 1 ഉം സൈറ്റോ 60 അയഡൈഡ് സ്റ്റെയിനിംഗ് നടത്തി (ചിത്രം 4). ബയോഫിലിമുകളുടെ ഇപിഎസിൽ ധാരാളമായി കാണപ്പെടുന്ന എക്സ്ട്രാ സെല്ലുലാർ ന്യൂക്ലിക് ആസിഡുകളെ കൃത്യമായി ദൃശ്യവൽക്കരിക്കാൻ ഉപയോഗിക്കാവുന്ന ഒരു സെൽ-ഇംപെർമെബിൾ ഡൈയാണ് ടോട്ടോ 1 അയഡൈഡ്. ഒരു കൌണ്ടർസ്റ്റെയിൻ ആയി ഉപയോഗിക്കുന്ന ഒരു സെൽ പെർമെബിൾ ഡൈയാണ് സൈറ്റോ 6016. സ്യൂഡോമോണസ് എരുഗിനോസ (ചിത്രം 4A-D), സ്റ്റാഫൈലോകോക്കസ് ഓറിയസ് (ചിത്രം 4I-L) എന്നിവയുടെ ബയോഫിലിമുകൾ ഉപയോഗിച്ച് കുത്തിവച്ച മുറിവുകളിൽ ടോട്ടോ 1 ഉം സൈറ്റോ 60 അയോഡൈഡും നടത്തിയ നിരീക്ഷണങ്ങൾ കാണിക്കുന്നത് 3 ദിവസത്തെ ഡ്രസ്സിംഗ് ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷം, ബയോഫിലിമിലെ ഇപിഎസ് ഗണ്യമായി കുറഞ്ഞു എന്നാണ്. ഓക്സിജൻ അടങ്ങിയ ലവണങ്ങൾ Ag, Ag1+ + EDTA/BC എന്നിവ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു. അധിക ആന്റിബയോഫിലിം ഘടകങ്ങളില്ലാത്ത Ag1+ ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ സ്യൂഡോമോണസ് എരുഗിനോസ ഉപയോഗിച്ച് കുത്തിവച്ച മുറിവുകളിൽ സെൽ-ഫ്രീ ഡിഎൻഎയെ ഗണ്യമായി കുറച്ചു, പക്ഷേ സ്റ്റാഫൈലോകോക്കസ് ഓറിയസ് ഉപയോഗിച്ച് കുത്തിവച്ച മുറിവുകളിൽ ഫലപ്രാപ്തി കുറവായിരുന്നു.
കൺട്രോൾ അല്ലെങ്കിൽ സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ ഉപയോഗിച്ച് 3 ദിവസത്തെ ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷം മുറിവ് ബയോഫിലിമിന്റെ ഇൻ വിവോ ഇമേജിംഗ്. എക്സ്ട്രാ സെല്ലുലാർ ബയോഫിലിം പോളിമറുകളുടെ ഒരു ഘടകമായ എക്സ്ട്രാ സെല്ലുലാർ ന്യൂക്ലിക് ആസിഡുകൾ ദൃശ്യവൽക്കരിക്കുന്നതിന് ടോട്ടോ 1 (പച്ച) ഉപയോഗിച്ച് സ്റ്റെയിൻ ചെയ്ത സ്യൂഡോമോണസ് എരുഗിനോസ (എ–ഡി), സ്റ്റാഫൈലോകോക്കസ് ഓറിയസ് (ഐ–എൽ) എന്നിവയുടെ കോൺഫോക്കൽ ചിത്രങ്ങൾ. ഇൻട്രാ സെല്ലുലാർ ന്യൂക്ലിക് ആസിഡുകൾ സ്റ്റെയിൻ ചെയ്യാൻ, സൈറ്റോ 60 (ചുവപ്പ്) ഉപയോഗിക്കുക. ആസിഡുകൾ. പി. കൺട്രോൾ, സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ ഉപയോഗിച്ച് 3 ദിവസത്തെ ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷം സ്യൂഡോമോണസ് എരുഗിനോസ (ഇ–എച്ച്), സ്റ്റാഫൈലോകോക്കസ് ഓറിയസ് (എം–പി) ബയോഫിലിമുകൾ ബാധിച്ച മുറിവുകളുടെ ഇലക്ട്രോൺ മൈക്രോസ്കോപ്പി സ്കാൻ ചെയ്യുന്നു. SEM സ്കെയിൽ ബാർ = 5 µm. കൺഫോക്കൽ ഇമേജിംഗ് സ്കെയിൽ ബാർ = 50 µm.
സ്കാനിംഗ് ഇലക്ട്രോൺ മൈക്രോസ്കോപ്പിയിൽ, സ്യൂഡോമോണസ് എരുഗിനോസ (ചിത്രം 4E-H), സ്റ്റാഫൈലോകോക്കസ് ഓറിയസ് (ചിത്രം 4M-P) എന്നിവയുടെ ബയോഫിലിം കോളനികൾ കുത്തിവച്ച എലികളുടെ മുറിവുകളിൽ, വെള്ളി ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ ഉപയോഗിച്ചുള്ള 3 ദിവസത്തെ ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷം, ബാക്ടീരിയകളുടെ എണ്ണം ഗണ്യമായി കുറഞ്ഞതായി കാണിച്ചു.
ബയോഫിലിം ബാധിച്ച എലികളിലെ മുറിവ് വീക്കത്തിൽ വെള്ളി ഡ്രെസ്സിംഗിന്റെ സ്വാധീനം വിലയിരുത്തുന്നതിന്, കൺട്രോൾ അല്ലെങ്കിൽ വെള്ളി ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ ഉപയോഗിച്ച് 3 ദിവസത്തേക്ക് ചികിത്സിച്ച ബയോഫിലിം ബാധിച്ച മുറിവുകളുടെ ഭാഗങ്ങൾ ന്യൂട്രോഫിലുകൾക്കും മാക്രോഫേജുകൾക്കും പ്രത്യേക ആന്റിബോഡികൾ ഉപയോഗിച്ച് ഇമ്മ്യൂണോഹിസ്റ്റോകെമിക്കലി സ്റ്റെയിൻ ചെയ്തു. ആന്തരികമായി ന്യൂട്രോഫിലുകളുടെയും മാക്രോഫേജുകളുടെയും അളവ് നിർണ്ണയിക്കൽ. ഗ്രാനുലേഷൻ ടിഷ്യു. ചിത്രം 5). മൂന്ന് ദിവസത്തെ ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷം, ആന്റിമൈക്രോബയൽ അല്ലാത്ത കൺട്രോൾ ഡ്രെസ്സിംഗുകളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, എല്ലാ വെള്ളി ഡ്രെസ്സിംഗുകളും സ്യൂഡോമോണസ് എരുഗിനോസ ബാധിച്ച മുറിവുകളിലെ ന്യൂട്രോഫിലുകളുടെയും മാക്രോഫേജുകളുടെയും എണ്ണം കുറച്ചു. എന്നിരുന്നാലും, ഓക്സിജൻ അടങ്ങിയ വെള്ളി ഉപ്പ് ഡ്രസ്സിംഗ് ഉപയോഗിച്ചുള്ള ചികിത്സ പരിശോധിച്ച മറ്റ് വെള്ളി ഡ്രെസ്സിംഗുകളെ അപേക്ഷിച്ച് ന്യൂട്രോഫിലുകളിലും (p = <0.0001) മാക്രോഫേജുകളിലും (p = <0.0001) വലിയ കുറവിന് കാരണമായി (ചിത്രം 5I,J). മുറിവ് ബയോഫിലിമിൽ Ag1+ + EDTA/BC കൂടുതൽ സ്വാധീനം ചെലുത്തിയെങ്കിലും, ഇത് Ag1+ ഡ്രെസ്സിംഗിനെ അപേക്ഷിച്ച് ന്യൂട്രോഫിൽ, മാക്രോഫേജ് അളവ് കുറഞ്ഞു. നിയന്ത്രണ വിഭാഗവുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ Ag (p = <0.0001), Ag1+ (p = 0.0008), Ag1++ EDTA/BC (p = 0.0043) ഓക്സിസോളുകൾ എന്നിവ ഉപയോഗിച്ചുള്ള ഡ്രസ്സിംഗിന് ശേഷം S. aureus ബയോഫിലിം ബാധിച്ച മിതമായ മുറിവുകളും നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടു. ന്യൂട്രോപീനിയ വിഭാഗത്തിനും സമാനമായ പ്രവണതകൾ നിരീക്ഷിക്കപ്പെടുന്നു. ബാൻഡേജ് (ചിത്രം 5K). എന്നിരുന്നാലും, S. aureus ബയോഫിലിമുകൾ ബാധിച്ച മുറിവുകളിലെ നിയന്ത്രണ വിഭാഗവുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ ഗ്രാനുലേഷൻ ടിഷ്യുവിലെ മാക്രോഫേജുകളുടെ എണ്ണത്തിൽ ഓക്സിജൻ അടങ്ങിയ Ag ഉപ്പ് ഡ്രസ്സിംഗ് മാത്രമേ ഗണ്യമായ കുറവ് കാണിച്ചിട്ടുള്ളൂ (p = 0.0339) (ചിത്രം 5L).
സ്യൂഡോമോണസ് എരുഗിനോസ, സ്റ്റാഫൈലോകോക്കസ് ഓറിയസ് ബയോഫിലിമുകൾ എന്നിവ ബാധിച്ച മുറിവുകളിൽ, നോൺ-ആന്റിമൈക്രോബയൽ കൺട്രോൾ അല്ലെങ്കിൽ സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ ഉപയോഗിച്ച് 3 ദിവസത്തെ ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷം ന്യൂട്രോഫില്ലുകളും മാക്രോഫേജുകളും അളന്നു. ന്യൂട്രോഫിലുകൾക്കോ ​​മാക്രോഫേജുകൾക്കോ ​​പ്രത്യേക ആന്റിബോഡികൾ കൊണ്ട് നിറച്ച ടിഷ്യു വിഭാഗങ്ങളിൽ ന്യൂട്രോഫില്ലുകളും (എഡി) മാക്രോഫേജുകളും (ഇഎച്ച്) അളന്നു. സ്യൂഡോമോണസ് എരുഗിനോസ (ഐ, ജെ), സ്റ്റാഫൈലോകോക്കസ് ഓറിയസ് (കെ & എൽ) ബയോഫിലിമുകൾ എന്നിവയാൽ ബാധിച്ച മുറിവുകളിൽ ന്യൂട്രോഫിലുകൾ (ഐ, കെ) മാക്രോഫേജുകൾ (ജെ, എൽ) എന്നിവയുടെ അളവ്. ഗ്രൂപ്പിന് N = 12. ഗ്രാഫുകൾ ശരാശരി +/- സ്റ്റാൻഡേർഡ് പിശക് കാണിക്കുന്നു, നോൺ-ആന്റിബാക്ടീരിയൽ കൺട്രോൾ ഡ്രസ്സിംഗുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ പ്രാധാന്യ മൂല്യങ്ങൾ, * അതായത് p = < 0.05, ** എന്നാൽ p = < 0.01; *** എന്നാൽ p = < 0.001; p = < 0.001 സൂചിപ്പിക്കുന്നു p = <0.0001).
അണുബാധയെ ആശ്രയിക്കാത്ത രോഗശാന്തിയിൽ വെള്ളി ഡ്രെസ്സിംഗിന്റെ പ്രഭാവം ഞങ്ങൾ വിലയിരുത്തി. അണുബാധയില്ലാത്ത എക്സിഷണൽ മുറിവുകൾക്ക് 3 ദിവസത്തേക്ക് ഒരു നോൺ-ആന്റിമൈക്രോബയൽ കൺട്രോൾ ഡ്രസ്സിംഗ് അല്ലെങ്കിൽ ഒരു വെള്ളി ഡ്രസ്സിംഗ് ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിച്ചു (ചിത്രം 6). പരിശോധിച്ച വെള്ളി ഡ്രെസ്സിംഗുകളിൽ, ഓക്സിജൻ അടങ്ങിയ ഉപ്പ് ഡ്രസ്സിംഗ് ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിച്ച മുറിവുകൾ മാത്രമേ മാക്രോസ്കോപ്പിക് ചിത്രങ്ങളിൽ കൺട്രോൾ ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിച്ച മുറിവുകളേക്കാൾ ചെറുതായി കാണപ്പെട്ടുള്ളൂ (ചിത്രം 6A-D). ഹിസ്റ്റോളജിക്കൽ വിശകലനം ഉപയോഗിച്ച് മുറിവിന്റെ വിസ്തൃതിയുടെ അളവ് കാണിക്കുന്നത്, Ag ഓക്സിസോൾസ് ഡ്രസ്സിംഗ് ഉപയോഗിച്ചുള്ള ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷമുള്ള ശരാശരി മുറിവ് വിസ്തീർണ്ണം കൺട്രോൾ ഗ്രൂപ്പുമായി ചികിത്സിച്ച മുറിവുകൾക്ക് 2.96 mm2 മായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ 2.35 mm2 ആണെന്നാണ്, എന്നാൽ ഈ വ്യത്യാസം സ്റ്റാറ്റിസ്റ്റിക്കൽ പ്രാധാന്യത്തിൽ എത്തിയില്ല (p = 0.488) (ചിത്രം 6I). ഇതിനു വിപരീതമായി, നിയന്ത്രണ ഗ്രൂപ്പുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ Ag1+ (3.38 mm2, p = 0.757) അല്ലെങ്കിൽ Ag1+ + EDTA/BC (4.18 mm2, p = 0.054) ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ ഉപയോഗിച്ചുള്ള ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷം മുറിവിന്റെ വിസ്തൃതിയിൽ ഒരു കുറവും ഉണ്ടായില്ല. നിയന്ത്രണ ഗ്രൂപ്പുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ (യഥാക്രമം 30% vs. 22%) Ag ഓക്സിസോൾ ഡ്രസ്സിംഗിൽ എപ്പിത്തീലിയൽ പുനരുജ്ജീവനത്തിൽ വർദ്ധനവ് നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടു, എന്നിരുന്നാലും ഇത് പ്രാധാന്യത്തിൽ എത്തിയില്ല (p = 0.067), ഇത് വളരെ പ്രധാനമാണ്, കൂടാതെ മുൻ ഫലങ്ങളെ സ്ഥിരീകരിക്കുന്നു. ഓക്സിസോളുകൾ ഉപയോഗിച്ചുള്ള ഡ്രസ്സിംഗ് വീണ്ടും എപ്പിത്തീലിയലൈസേഷൻ പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്നു. - അണുബാധയില്ലാത്ത മുറിവുകളുടെ എപ്പിത്തീലിയലൈസേഷൻ17. ഇതിനു വിപരീതമായി, Ag1+ അല്ലെങ്കിൽ Ag1+ + EDTA/BC ഡ്രസ്സിംഗുകൾ ഉപയോഗിച്ചുള്ള ചികിത്സ നിയന്ത്രണ ഗ്രൂപ്പുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ ഒരു ഫലവും ഉണ്ടാക്കിയില്ല അല്ലെങ്കിൽ വീണ്ടും എപ്പിത്തീലിയലൈസേഷൻ കുറഞ്ഞു.
അണുബാധയില്ലാത്ത എലികളിൽ പൂർണ്ണമായ വിഘടനത്തിലൂടെ മുറിവ് ഉണക്കുന്നതിൽ വെള്ളി മുറിവ് ഡ്രസ്സിംഗിന്റെ പ്രഭാവം. (AD) ആന്റിമൈക്രോബയൽ അല്ലാത്ത നിയന്ത്രണ ഡ്രസ്സിംഗും വെള്ളി ഡ്രസ്സിംഗും ഉപയോഗിച്ച് മൂന്ന് ദിവസത്തെ ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷമുള്ള മുറിവുകളുടെ പ്രതിനിധി മാക്രോസ്കോപ്പിക് ചിത്രങ്ങൾ. (EH) ഹെമറ്റോക്സിലിൻ, ഇയോസിൻ എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് കറപിടിച്ച പ്രതിനിധി മുറിവ് ഭാഗങ്ങൾ. ഇമേജ് വിശകലന സോഫ്റ്റ്‌വെയർ ഉപയോഗിച്ച് മുറിവിന്റെ മധ്യഭാഗത്തുള്ള ഹിസ്റ്റോളജിക്കൽ വിഭാഗങ്ങളിൽ നിന്ന് മുറിവ് വിസ്തീർണ്ണം (I) യുടെ അളവും റീഎപിത്തീലിയലൈസേഷന്റെ (J) ശതമാനവും കണക്കാക്കി (ചികിത്സാ ഗ്രൂപ്പിന് n = 11–12). ഗ്രാഫുകൾ ശരാശരി +/- സ്റ്റാൻഡേർഡ് പിശക് കാണിക്കുന്നു. * അർത്ഥം p = <0.05.
മുറിവ് ഉണക്കുന്നതിൽ ആന്റിമൈക്രോബയൽ തെറാപ്പിയായി വെള്ളി വളരെക്കാലമായി ഉപയോഗിക്കുന്നുണ്ട്, എന്നാൽ വ്യത്യസ്ത ഫോർമുലേഷനുകളും ഡെലിവറി രീതികളും ആന്റിമൈക്രോബയൽ ഫലപ്രാപ്തിയിൽ വ്യത്യാസങ്ങൾക്ക് കാരണമായേക്കാം 18. മാത്രമല്ല, നിർദ്ദിഷ്ട സിൽവർ ഡെലിവറി സിസ്റ്റങ്ങളുടെ ആന്റിബയോഫിലിം ഗുണങ്ങൾ പൂർണ്ണമായി മനസ്സിലാക്കാൻ കഴിഞ്ഞിട്ടില്ല. പ്ലാങ്ക്ടോണിക് ബാക്ടീരിയകൾക്കെതിരെ ഹോസ്റ്റ് രോഗപ്രതിരോധ പ്രതികരണം താരതമ്യേന ഫലപ്രദമാണെങ്കിലും, ബയോഫിലിമുകൾക്കെതിരെ ഇത് സാധാരണയായി കുറവാണ്19. പ്ലാങ്ക്ടോണിക് ബാക്ടീരിയകൾ മാക്രോഫേജുകളാൽ എളുപ്പത്തിൽ ഫാഗോസൈറ്റോസ് ചെയ്യപ്പെടുന്നു, എന്നാൽ ബയോഫിലിമുകൾക്കുള്ളിൽ, രോഗപ്രതിരോധ കോശങ്ങൾക്ക് അപ്പോപ്‌ടോസിസിന് വിധേയമാകാനും രോഗപ്രതിരോധ പ്രതികരണം വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിന് പ്രോഇൻഫ്ലമേറ്ററി ഘടകങ്ങൾ പുറത്തുവിടാനും കഴിയുന്ന പരിധി വരെ ഹോസ്റ്റ് പ്രതികരണത്തെ പരിമിതപ്പെടുത്തുന്നതിലൂടെ അഗ്രഗേറ്റഡ് കോശങ്ങൾ അധിക പ്രശ്നങ്ങൾ സൃഷ്ടിക്കുന്നു20. ചില ല്യൂക്കോസൈറ്റുകൾക്ക് ബയോഫിലിമുകളിലേക്ക് തുളച്ചുകയറാൻ കഴിയുമെന്ന് നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടിട്ടുണ്ട്21, എന്നാൽ ഈ പ്രതിരോധം തകരാറിലായാൽ ബാക്ടീരിയകളെ ഫാഗോസൈറ്റോസ് ചെയ്യാൻ കഴിയില്ല22. മുറിവ് ബയോഫിലിം അണുബാധയ്‌ക്കെതിരെ ഹോസ്റ്റ് രോഗപ്രതിരോധ പ്രതികരണത്തെ പിന്തുണയ്ക്കാൻ ഒരു സമഗ്രമായ സമീപനം ഉപയോഗിക്കണം. മുറിവ് ഡീബ്രൈഡ്മെന്റ് ബയോഫിലിമിനെ ശാരീരികമായി തടസ്സപ്പെടുത്തുകയും മിക്ക ബയോബർഡനും നീക്കം ചെയ്യുകയും ചെയ്യും, എന്നാൽ ശേഷിക്കുന്ന ബയോഫിലിമിനെതിരെ ഹോസ്റ്റ് രോഗപ്രതിരോധ പ്രതികരണം ഫലപ്രദമല്ലായിരിക്കാം, പ്രത്യേകിച്ച് ഹോസ്റ്റ് രോഗപ്രതിരോധ പ്രതികരണം വിട്ടുവീഴ്ച ചെയ്യപ്പെടുകയാണെങ്കിൽ. അതിനാൽ, സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ പോലുള്ള ആന്റിമൈക്രോബയൽ തെറാപ്പികൾക്ക് ആതിഥേയ രോഗപ്രതിരോധ പ്രതികരണത്തെ പിന്തുണയ്ക്കാനും ബയോഫിലിം അണുബാധകൾ ഇല്ലാതാക്കാനും കഴിയും. ഘടന, സാന്ദ്രത, ലയിക്കുന്നത, ഡെലിവറി സബ്‌സ്‌ട്രേറ്റ് എന്നിവ വെള്ളിയുടെ ആന്റിമൈക്രോബയൽ ഫലപ്രാപ്തിയെ സ്വാധീനിക്കും. സമീപ വർഷങ്ങളിൽ, സിൽവർ പ്രോസസ്സിംഗ് സാങ്കേതികവിദ്യയിലെ പുരോഗതി ഈ ഡ്രെസ്സിംഗുകളെ കൂടുതൽ ഫലപ്രദമാക്കിയിട്ടുണ്ട്9,23. സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗ് സാങ്കേതികവിദ്യ പുരോഗമിക്കുമ്പോൾ, മുറിവ് അണുബാധ നിയന്ത്രിക്കുന്നതിലും, അതിലും പ്രധാനമായി, മുറിവ് പരിസ്ഥിതിയിലും രോഗശാന്തിയിലും ഈ ശക്തമായ വെള്ളി രൂപങ്ങളുടെ സ്വാധീനത്തിലും ഈ ഡ്രെസ്സിംഗുകളുടെ ഫലപ്രാപ്തി മനസ്സിലാക്കേണ്ടത് പ്രധാനമാണ്.
ഈ പഠനത്തിൽ, വ്യത്യസ്ത ഇൻ വിട്രോ, ഇൻ വിവോ മോഡലുകൾ ഉപയോഗിച്ച് ബയോഫിലിമുകൾക്കെതിരെ Ag1+ അയോണുകൾ ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്ന പരമ്പരാഗത സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗുകളുമായി രണ്ട് അഡ്വാൻസ്ഡ് സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗുകളുടെ ഫലപ്രാപ്തിയെ ഞങ്ങൾ താരതമ്യം ചെയ്തു. മുറിവിന്റെ അന്തരീക്ഷത്തിലും അണുബാധ-സ്വതന്ത്ര രോഗശാന്തിയിലും ഈ ഡ്രെസ്സിംഗുകളുടെ സ്വാധീനവും ഞങ്ങൾ വിലയിരുത്തി. ഡെലിവറി മാട്രിക്സിന്റെ സ്വാധീനം കുറയ്ക്കുന്നതിന്, പരീക്ഷിച്ച എല്ലാ സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗുകളും കാർബോക്സിമീഥൈൽ സെല്ലുലോസ് അടങ്ങിയതാണ്.
സ്യൂഡോമോണസ് എരുഗിനോസ, സ്റ്റാഫൈലോകോക്കസ് ഓറിയസ് എന്നിവയുടെ കൊളോണിയൽ ബയോഫിലിമുകൾക്കെതിരായ ഈ സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗുകളുടെ പ്രാഥമിക വിലയിരുത്തൽ കാണിക്കുന്നത്, പരമ്പരാഗത Ag1+ ഡ്രെസ്സിംഗുകളിൽ നിന്ന് വ്യത്യസ്തമായി, രണ്ട് അഡ്വാൻസ്ഡ് സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗുകളായ Ag1+ + EDTA/BC, ഓക്സിജൻ അടങ്ങിയ Ag ലവണങ്ങൾ എന്നിവ 5%-ൽ ഫലപ്രദമാണ് എന്നാണ്. ഏതാനും ദിവസങ്ങൾക്കുള്ളിൽ ബയോഫിലിം ബാക്ടീരിയകളെ ഫലപ്രദമായി കൊല്ലുന്നു. കൂടാതെ, പ്ലാങ്ക്ടോണിക് ബാക്ടീരിയകളുമായി ആവർത്തിച്ച് സമ്പർക്കം പുലർത്തുമ്പോൾ ബയോഫിലിമിന്റെ പുനർരൂപീകരണം ഈ ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ തടയുന്നു. Ag1+ ഡ്രെസ്സിംഗിൽ Ag1+ + EDTA/BC യുടെ അതേ സിൽവർ സംയുക്തവും ബേസ് മാട്രിക്സും ആയ സിൽവർ ക്ലോറൈഡ് അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു, കൂടാതെ അതേ കാലയളവിൽ ബയോഫിലിമിനുള്ളിലെ ബാക്ടീരിയൽ പ്രവർത്തനക്ഷമതയിൽ പരിമിതമായ സ്വാധീനം ചെലുത്തുകയും ചെയ്തു. ഒരേ മാട്രിക്സും ഒരു സിൽവർ സംയുക്തവും അടങ്ങിയ Ag1+ ഡ്രസ്സിംഗിനെക്കാൾ ബയോഫിലിമിനെതിരെ Ag1+ + EDTA/BC ഡ്രസ്സിംഗ് കൂടുതൽ ഫലപ്രദമാണെന്ന നിരീക്ഷണം, മറ്റിടങ്ങളിൽ റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തതുപോലെ, ബയോഫിലിമിനെതിരെ സിൽവർ ക്ലോറൈഡിന്റെ ഫലപ്രാപ്തി വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിന് അധിക ചേരുവകൾ ആവശ്യമാണെന്ന ധാരണയെ പിന്തുണയ്ക്കുന്നു15. മൊത്തത്തിലുള്ള ഡ്രസ്സിംഗ് ഫലപ്രാപ്തിയിൽ BC, EDTA എന്നിവയ്ക്ക് അധിക പങ്കുണ്ട് എന്ന ആശയത്തെ ഈ ഫലങ്ങൾ പിന്തുണയ്ക്കുന്നു, കൂടാതെ Ag1+ ഡ്രസ്സിംഗുകളിൽ ഈ ഘടകത്തിന്റെ അഭാവം ഇൻ വിട്രോ ഫലപ്രാപ്തി പ്രകടിപ്പിക്കുന്നതിൽ പരാജയപ്പെട്ടിരിക്കാം. Ag2+, Ag3+ അയോണുകൾ ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്ന ഓക്സിജൻ അടങ്ങിയ Ag ഉപ്പ് ഡ്രസ്സിംഗുകൾ Ag1+ നേക്കാൾ ശക്തമായ ആൻറി ബാക്ടീരിയൽ ഫലപ്രാപ്തി പ്രകടിപ്പിക്കുകയും Ag1+ + EDTA/BC ന് സമാനമായ തലങ്ങളിൽ പ്രവർത്തിക്കുകയും ചെയ്തുവെന്ന് ഞങ്ങൾ കണ്ടെത്തി. എന്നിരുന്നാലും, ഉയർന്ന റെഡോക്സ് സാധ്യത കാരണം, മുറിവ് ബയോഫിലിമുകൾക്കെതിരെ Ag3+ അയോണുകൾ എത്രത്തോളം സജീവമായും ഫലപ്രദമായും തുടരുന്നുവെന്ന് വ്യക്തമല്ല, അതിനാൽ കൂടുതൽ പഠനത്തിന് അർഹമാണ്. കൂടാതെ, ഈ പഠനത്തിൽ പരീക്ഷിച്ചിട്ടില്ലാത്ത Ag1+ അയോണുകൾ ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്ന നിരവധി വ്യത്യസ്ത ഡ്രസ്സിംഗുകൾ ഉണ്ട്. ഈ ഡ്രസ്സിംഗുകളിൽ Ag1+ അയോണുകളുടെ വിതരണത്തെയും ബയോഫിലിമുകൾക്കെതിരായ അവയുടെ ഫലപ്രാപ്തിയെയും സ്വാധീനിച്ചേക്കാവുന്ന വ്യത്യസ്ത വെള്ളി സംയുക്തങ്ങൾ, സാന്ദ്രതകൾ, ബേസ് മാട്രിക്സുകൾ എന്നിവ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു. ബയോഫിലിമുകൾക്കെതിരായ മുറിവ് ഡ്രസ്സിംഗുകളുടെ ഫലപ്രാപ്തി വിലയിരുത്തുന്നതിന് ഉപയോഗിക്കുന്ന ഇൻ വിട്രോ, ഇൻ വിവോ മോഡലുകൾ നിരവധി വ്യത്യസ്തമാണെന്നതും ശ്രദ്ധിക്കേണ്ടതാണ്. ഉപയോഗിക്കുന്ന മോഡലിന്റെ തരവും ഈ മോഡലുകളിൽ ഉപയോഗിക്കുന്ന മീഡിയയുടെ ഉപ്പും പ്രോട്ടീനും ഡ്രസ്സിംഗിന്റെ ഫലപ്രാപ്തിയെ സ്വാധീനിക്കും. ഞങ്ങളുടെ ഇൻ വിവോ മോഡലിൽ, ബയോഫിലിം ഇൻ വിട്രോയിൽ പാകമാകാൻ അനുവദിക്കുകയും പിന്നീട് അത് മുറിവിന്റെ ചർമ്മ ഉപരിതലത്തിലേക്ക് മാറ്റുകയും ചെയ്തു. മുറിവിൽ പ്രയോഗിക്കുന്ന പ്ലാങ്ക്ടോണിക് ബാക്ടീരിയകൾക്കെതിരെ ഹോസ്റ്റ് എലിയുടെ രോഗപ്രതിരോധ പ്രതികരണം താരതമ്യേന ഫലപ്രദമാണ്, അതുവഴി മുറിവ് ഉണങ്ങുമ്പോൾ ഒരു ബയോഫിലിം രൂപം കൊള്ളുന്നു. ഒരു മുറിവിൽ പക്വമായ ബയോഫിലിം ചേർക്കുന്നത്, രോഗശാന്തി ആരംഭിക്കുന്നതിന് മുമ്പ് മുറിവിനുള്ളിൽ പക്വമായ ബയോഫിലിം സ്വയം സ്ഥാപിക്കാൻ അനുവദിക്കുന്നതിലൂടെ, ബയോഫിലിം രൂപീകരണത്തോടുള്ള ഹോസ്റ്റ് രോഗപ്രതിരോധ പ്രതികരണത്തിന്റെ ഫലപ്രാപ്തിയെ പരിമിതപ്പെടുത്തുന്നു. അങ്ങനെ, മുറിവുകൾ ഉണങ്ങാൻ തുടങ്ങുന്നതിനുമുമ്പ് പക്വമായ ബയോഫിലിമുകളിൽ ആന്റിമൈക്രോബയൽ ഡ്രെസ്സിംഗുകളുടെ ഫലപ്രാപ്തി വിലയിരുത്താൻ ഞങ്ങളുടെ മാതൃക ഞങ്ങളെ അനുവദിക്കുന്നു.
ഇൻ വിട്രോയിൽ വളരുന്ന ബയോഫിലിമുകളിലും പന്നിയിറച്ചി ചർമ്മത്തിലും വെള്ളി ഡ്രെസ്സിംഗുകളുടെ ഫലപ്രാപ്തിയെ ഡ്രസ്സിംഗ് ഫിറ്റ് സ്വാധീനിക്കുന്നുണ്ടെന്ന് ഞങ്ങൾ കണ്ടെത്തി. ഡ്രെസ്സിംഗിന്റെ ആന്റിമൈക്രോബയൽ ഫലപ്രാപ്തിക്ക് മുറിവുമായുള്ള അടുത്ത സമ്പർക്കം നിർണായകമായി കണക്കാക്കപ്പെടുന്നു24,25. ഓക്സിജൻ അടങ്ങിയ Ag ലവണങ്ങൾ അടങ്ങിയ ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ മുതിർന്ന ബയോഫിലിമുകളുമായി അടുത്ത സമ്പർക്കത്തിലായിരുന്നു, ഇത് 24 മണിക്കൂറിനുശേഷം ബയോഫിലിമിനുള്ളിലെ പ്രായോഗിക ബാക്ടീരിയകളുടെ എണ്ണത്തിൽ ഗണ്യമായ കുറവുണ്ടാക്കി. ഇതിനു വിപരീതമായി, Ag1+, Ag1+ + EDTA/BC ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിക്കുമ്പോൾ, ഗണ്യമായ എണ്ണം പ്രായോഗിക ബാക്ടീരിയകൾ അവശേഷിച്ചു. ഈ ഡ്രെസ്സിംഗുകളിൽ ഡ്രെസ്സിംഗിന്റെ മുഴുവൻ നീളത്തിലും തുന്നലുകൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു, ഇത് ബയോഫിലിമുമായുള്ള അടുത്ത സമ്പർക്കം തടയുന്ന നിർജ്ജീവ ഇടങ്ങൾ സൃഷ്ടിക്കുന്നു. ഞങ്ങളുടെ ഇൻ വിട്രോ പഠനങ്ങളിൽ, ഈ നോൺ-കോൺടാക്റ്റ് ഏരിയകൾ ബയോഫിലിമിനുള്ളിലെ പ്രായോഗിക ബാക്ടീരിയകളുടെ മരണത്തെ തടഞ്ഞു. 24 മണിക്കൂർ ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷമാണ് ഞങ്ങൾ ബാക്ടീരിയയുടെ പ്രവർത്തനക്ഷമത വിലയിരുത്തിയത്; കാലക്രമേണ, ഡ്രസ്സിംഗ് കൂടുതൽ പൂരിതമാകുമ്പോൾ, കുറഞ്ഞ ഡെഡ് സ്പേസ് ഉണ്ടാകാം, ഇത് ഈ പ്രായോഗിക ബാക്ടീരിയകൾക്കുള്ള വിസ്തീർണ്ണം കുറയ്ക്കുന്നു. എന്നിരുന്നാലും, ഡ്രെസ്സിംഗിലെ വെള്ളിയുടെ തരം മാത്രമല്ല, ഡ്രെസ്സിംഗിന്റെ ഘടനയുടെ പ്രാധാന്യത്തെ ഇത് എടുത്തുകാണിക്കുന്നു.
വ്യത്യസ്ത സിൽവർ സാങ്കേതികവിദ്യകളുടെ ഫലപ്രാപ്തി താരതമ്യം ചെയ്യുന്നതിന് ഇൻ വിട്രോ പഠനങ്ങൾ ഉപയോഗപ്രദമാണെങ്കിലും, ഇൻ വിവോയിലെ ബയോഫിലിമുകളിൽ ഈ ഡ്രെസ്സിംഗുകളുടെ ഫലങ്ങൾ മനസ്സിലാക്കേണ്ടതും പ്രധാനമാണ്, ഇവിടെ ഹോസ്റ്റ് ടിഷ്യുവും രോഗപ്രതിരോധ പ്രതികരണങ്ങളും ബയോഫിലിമുകൾക്കെതിരായ ഡ്രെസ്സിംഗുകളുടെ ഫലപ്രാപ്തിക്ക് കാരണമാകുന്നു. ഇൻട്രാ സെല്ലുലാർ, എക്സ്ട്രാ സെല്ലുലാർ ഡിഎൻഎ ഡൈകൾ ഉപയോഗിച്ച് ബയോഫിലിമിന്റെ സ്കാനിംഗ് ഇലക്ട്രോൺ മൈക്രോസ്കോപ്പിയും ഇപിഎസ് സ്റ്റെയിനിംഗും ഉപയോഗിച്ച് മുറിവ് ബയോഫിലിമുകളിൽ ഈ ഡ്രെസ്സിംഗുകളുടെ സ്വാധീനം നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടു. 3 ദിവസത്തെ ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷം, ബയോഫിലിം ബാധിച്ച മുറിവുകളിൽ കോശരഹിതമായ ഡിഎൻഎ കുറയ്ക്കുന്നതിന് എല്ലാ ഡ്രെസ്സിംഗുകളും ഫലപ്രദമാണെന്ന് ഞങ്ങൾ കണ്ടെത്തി, എന്നാൽ സ്റ്റാഫൈലോകോക്കസ് ഓറിയസ് ബാധിച്ച മുറിവുകളിൽ Ag1+ ഡ്രെസ്സിംഗിന്റെ ഫലപ്രാപ്തി കുറവായിരുന്നു. സ്കാനിംഗ് ഇലക്ട്രോൺ മൈക്രോസ്കോപ്പിയിൽ സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിച്ച മുറിവുകളിൽ ബാക്ടീരിയകൾ ഗണ്യമായി കുറവാണെന്ന് കാണിച്ചു, എന്നിരുന്നാലും Ag1+ ഡ്രെസ്സിംഗിനെ അപേക്ഷിച്ച് ഓക്സിജൻ അടങ്ങിയ Ag ഉപ്പ് ഡ്രസ്സിംഗും Ag1+ + EDTA/BC ഡ്രസ്സിംഗും ഉപയോഗിച്ച് ഇത് കൂടുതൽ പ്രകടമായിരുന്നു. പരിശോധിച്ച സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗുകൾക്ക് ബയോഫിലിം ഘടനയിൽ വ്യത്യസ്ത അളവിലുള്ള സ്വാധീനമുണ്ടെന്ന് ഈ ഡാറ്റ കാണിക്കുന്നു, എന്നാൽ മുറിവ് ബയോഫിലിം അണുബാധകളുടെ ചികിത്സയ്ക്ക് ഒരു സമഗ്രമായ സമീപനത്തിന്റെ ആവശ്യകതയെ പിന്തുണയ്ക്കുന്ന, ഒരു സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗും ബയോഫിലിം ഇല്ലാതാക്കാൻ കഴിഞ്ഞില്ല; വെള്ളി ആംബാൻഡുകൾ ഉപയോഗിക്കുക. ചികിത്സയ്ക്ക് മുമ്പ് ബയോഫിലിമിന്റെ ഭൂരിഭാഗവും നീക്കം ചെയ്യുന്നതിനായി ശാരീരിക ഡീബ്രൈഡ്മെന്റ് നടത്തുന്നു.
വിട്ടുമാറാത്ത മുറിവുകൾ പലപ്പോഴും കഠിനമായ വീക്കം ഉള്ള അവസ്ഥയിലാണ്, അധിക കോശജ്വലന കോശങ്ങൾ മുറിവിലെ ടിഷ്യുവിൽ വളരെക്കാലം നിലനിൽക്കുകയും, ടിഷ്യു നാശത്തിന് കാരണമാവുകയും മുറിവിലെ കാര്യക്ഷമമായ കോശ രാസവിനിമയത്തിനും പ്രവർത്തനത്തിനും ആവശ്യമായ ഓക്സിജൻ ഇല്ലാതാക്കുകയും ചെയ്യുന്നു26. ബയോഫിലിമുകൾ കോശ വ്യാപനത്തെയും കുടിയേറ്റത്തെയും തടയുന്നതും പ്രോ-ഇൻഫ്ലമേറ്ററി സൈറ്റോകൈനുകളുടെ സജീവമാക്കലും ഉൾപ്പെടെ വിവിധ രീതികളിൽ രോഗശാന്തിയെ പ്രതികൂലമായി ബാധിക്കുന്നതിലൂടെ ഈ പ്രതികൂല മുറിവ് പരിസ്ഥിതിയെ വഷളാക്കുന്നു27. വെള്ളി ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ കൂടുതൽ ഫലപ്രദമാകുമ്പോൾ, മുറിവിന്റെ പരിസ്ഥിതിയിലും രോഗശാന്തിയിലും അവ ചെലുത്തുന്ന സ്വാധീനം മനസ്സിലാക്കേണ്ടത് പ്രധാനമാണ്.
രസകരമെന്നു പറയട്ടെ, എല്ലാ വെള്ളി ഡ്രെസ്സിംഗുകളും ബയോഫിലിം ഘടനയെ ബാധിച്ചുവെങ്കിലും, ഓക്സിജൻ അടങ്ങിയ സിൽവർ ഉപ്പ് ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ മാത്രമേ ഈ രോഗബാധിതമായ മുറിവുകളുടെ റീ-എപ്പിത്തീലിയലൈസേഷൻ വർദ്ധിപ്പിച്ചുള്ളൂ. ഈ ഡാറ്റ ഞങ്ങളുടെ മുൻ കണ്ടെത്തലുകളെ പിന്തുണയ്ക്കുന്നു17, കൂടാതെ ഓക്സിജൻ അടങ്ങിയ സിൽവർ ലവണങ്ങളുടെ നല്ല സുരക്ഷയും വിഷാംശ പ്രൊഫൈലുകളും പ്രകടമാക്കിയ കലൻ തുടങ്ങിയവരുടെ (2017)28 കണ്ടെത്തലുകളും, കാരണം ബയോഫിലിമുകൾക്കെതിരെ വെള്ളിയുടെ കുറഞ്ഞ സാന്ദ്രത ഫലപ്രദമാണ്.
ആന്റിമൈക്രോബയൽ സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗുകൾക്കിടയിലുള്ള വെള്ളി സാങ്കേതികവിദ്യയിലെ വ്യത്യാസങ്ങളും മുറിവ് പരിസ്ഥിതിയിലും അണുബാധയെ ആശ്രയിക്കാതെയുള്ള രോഗശാന്തിയിലും ഈ സാങ്കേതികവിദ്യയുടെ സ്വാധീനവും ഞങ്ങളുടെ നിലവിലെ പഠനം എടുത്തുകാണിക്കുന്നു. എന്നിരുന്നാലും, Ag1+ + EDTA/BC ഡ്രസ്സിംഗ് പരിക്കേറ്റ മുയലിന്റെ ചെവികളുടെ രോഗശാന്തി പാരാമീറ്ററുകൾ ഇൻ വിവോയിൽ മെച്ചപ്പെടുത്തിയെന്ന് കാണിക്കുന്ന മുൻ പഠനങ്ങളിൽ നിന്ന് ഈ ഫലങ്ങൾ വ്യത്യസ്തമാണ്. എന്നിരുന്നാലും, മൃഗങ്ങളുടെ മാതൃകകൾ, അളവെടുക്കൽ സമയം, ബാക്ടീരിയൽ പ്രയോഗ രീതികൾ എന്നിവയിലെ വ്യത്യാസങ്ങൾ ഇതിന് കാരണമാകാം. ഈ സാഹചര്യത്തിൽ, ഡ്രസ്സിംഗിന്റെ സജീവ ഘടകങ്ങൾ കൂടുതൽ സമയം ബയോഫിലിമിൽ പ്രവർത്തിക്കാൻ അനുവദിക്കുന്നതിന് പരിക്കിന് 12 ദിവസത്തിന് ശേഷം മുറിവിന്റെ അളവുകൾ എടുത്തു. Ag1+ + EDTA/BC ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിച്ച ക്ലിനിക്കലി അണുബാധയുള്ള കാലിലെ അൾസറുകൾ തുടക്കത്തിൽ ഒരു ആഴ്ച ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷം വലുപ്പം വർദ്ധിച്ചുവെന്നും പിന്നീട് Ag1+ + EDTA/BC ഉപയോഗിച്ചുള്ള അടുത്ത 3 ആഴ്ച ചികിത്സയിലും ആന്റിമൈക്രോബയലുകൾ അല്ലാത്തവ ഉപയോഗിച്ചതിന് 4 ആഴ്ചയ്ക്കുള്ളിലും വർദ്ധിച്ചുവെന്ന് കാണിക്കുന്ന ഒരു പഠനം ഇതിനെ പിന്തുണയ്ക്കുന്നു. മരുന്നുകൾ. അൾസറിന്റെ വലുപ്പം കുറയ്ക്കുന്നതിനുള്ള CMC ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ30.
വെള്ളിയുടെ ചില രൂപങ്ങളും സാന്ദ്രതകളും മുമ്പ് ഇൻ വിട്രോയിൽ സൈറ്റോടോക്സിക് ആണെന്ന് കാണിച്ചിട്ടുണ്ട് 11, എന്നാൽ ഈ ഇൻ വിട്രോ ഫലങ്ങൾ എല്ലായ്പ്പോഴും ഇൻ വിട്രോയിൽ പ്രതികൂല ഫലങ്ങളിലേക്ക് വിവർത്തനം ചെയ്യപ്പെടുന്നില്ല. കൂടാതെ, വെള്ളി സാങ്കേതികവിദ്യയിലെ പുരോഗതിയും വെള്ളി സംയുക്തങ്ങളെയും ഡ്രെസ്സിംഗുകളിലെ സാന്ദ്രതയെയും കുറിച്ചുള്ള മികച്ച ധാരണയും സുരക്ഷിതവും ഫലപ്രദവുമായ നിരവധി വെള്ളി ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ വികസിപ്പിക്കുന്നതിലേക്ക് നയിച്ചു. എന്നിരുന്നാലും, വെള്ളി ഡ്രെസ്സിംഗ് സാങ്കേതികവിദ്യ പുരോഗമിക്കുമ്പോൾ, മുറിവിന്റെ പരിതസ്ഥിതിയിൽ ഈ ഡ്രെസ്സിംഗുകളുടെ സ്വാധീനം മനസ്സിലാക്കേണ്ടത് പ്രധാനമാണ്31,32,33. റീ-എപ്പിത്തീലിയലൈസേഷന്റെ വർദ്ധിച്ച നിരക്ക് പ്രോ-ഇൻഫ്ലമേറ്ററി M1 ഫിനോടൈപ്പിനെ അപേക്ഷിച്ച് ആന്റി-ഇൻഫ്ലമേറ്ററി M2 മാക്രോഫേജുകളുടെ വർദ്ധിച്ച അനുപാതവുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നുവെന്ന് മുമ്പ് റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തിരുന്നു. സിൽവർ ഹൈഡ്രോജൽ മുറിവ് ഡ്രെസ്സിംഗുകളെ സിൽവർ സൾഫഡിയാസൈൻ, നോൺ-ആന്റിമൈക്രോബയൽ ഹൈഡ്രോജലുകൾ34 എന്നിവയുമായി താരതമ്യം ചെയ്ത മുൻ മൗസ് മോഡലിൽ ഇത് ശ്രദ്ധിക്കപ്പെട്ടു.
വിട്ടുമാറാത്ത മുറിവുകളിൽ അമിതമായ വീക്കം പ്രകടമാകാം, കൂടാതെ അധിക ന്യൂട്രോഫിലുകളുടെ സാന്നിധ്യം മുറിവ് ഉണക്കുന്നതിന് ഹാനികരമാകുമെന്ന് നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടിട്ടുണ്ട്35. ന്യൂട്രോഫിൽ-ക്ഷയിച്ച എലികളിൽ നടത്തിയ ഒരു പഠനത്തിൽ, ന്യൂട്രോഫിലുകളുടെ സാന്നിധ്യം റീഎപിത്തീലിയലൈസേഷൻ വൈകിപ്പിക്കുന്നു. അധിക ന്യൂട്രോഫിലുകളുടെ സാന്നിധ്യം ഉയർന്ന അളവിലുള്ള പ്രോട്ടീസുകളിലേക്കും സൂപ്പർഓക്സൈഡ്, ഹൈഡ്രജൻ പെറോക്സൈഡ് പോലുള്ള റിയാക്ടീവ് ഓക്സിജൻ സ്പീഷീസുകളിലേക്കും നയിക്കുന്നു, ഇവ വിട്ടുമാറാത്തതും സാവധാനത്തിൽ സുഖപ്പെടുത്തുന്നതുമായ മുറിവുകളുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു37,38. അതുപോലെ, മാക്രോഫേജ് എണ്ണത്തിലെ വർദ്ധനവ്, അനിയന്ത്രിതമാണെങ്കിൽ, മുറിവ് ഉണക്കുന്നതിൽ കാലതാമസമുണ്ടാക്കും39. മാക്രോഫേജുകൾക്ക് ഒരു പ്രോ-ഇൻഫ്ലമേറ്ററി ഫിനോടൈപ്പിൽ നിന്ന് പ്രോ-ഹീലിംഗ് ഫിനോടൈപ്പിലേക്ക് മാറാൻ കഴിയുന്നില്ലെങ്കിൽ ഈ വർദ്ധനവ് പ്രത്യേകിച്ചും പ്രധാനമാണ്, അതിന്റെ ഫലമായി മുറിവുകൾ രോഗശാന്തിയുടെ വീക്കം ഘട്ടത്തിൽ നിന്ന് പുറത്തുകടക്കാൻ കഴിയുന്നില്ല40. എല്ലാ സിൽവർ ഡ്രെസ്സിംഗുകളും ഉപയോഗിച്ചുള്ള 3 ദിവസത്തെ ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷം ബയോഫിലിം ബാധിച്ച മുറിവുകളിൽ ന്യൂട്രോഫിലുകളിലും മാക്രോഫേജുകളിലും കുറവ് ഞങ്ങൾ നിരീക്ഷിച്ചു, പക്ഷേ ഓക്സിജൻ അടങ്ങിയ ഉപ്പ് ഡ്രെസ്സിംഗുകൾ ഉപയോഗിച്ചാൽ ഈ കുറവ് കൂടുതൽ പ്രകടമായി. വെള്ളിയോടുള്ള രോഗപ്രതിരോധ പ്രതികരണത്തിന്റെ നേരിട്ടുള്ള ഫലമായിരിക്കാം, ബയോബർഡൻ കുറയുന്നതിനോടുള്ള പ്രതികരണമായിരിക്കാം, അല്ലെങ്കിൽ മുറിവ് രോഗശാന്തിയുടെ അവസാന ഘട്ടത്തിലായതിനാൽ മുറിവിലെ രോഗപ്രതിരോധ കോശങ്ങൾ കുറയുന്നു. മുറിവിലെ കോശജ്വലന കോശങ്ങളുടെ എണ്ണം കുറയ്ക്കുന്നത് മുറിവ് ഉണക്കുന്നതിന് അനുകൂലമായ ഒരു അന്തരീക്ഷം നിലനിർത്തിയേക്കാം. അണുബാധയെ ആശ്രയിക്കാതെ രോഗശാന്തിയെ പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്ന Ag ഓക്സിസാൾട്ടുകളുടെ പ്രവർത്തനരീതി വ്യക്തമല്ല, എന്നാൽ ഓക്സിജൻ ഉത്പാദിപ്പിക്കാനും വീക്കത്തിന്റെ മധ്യസ്ഥനായ ഹൈഡ്രജൻ പെറോക്സൈഡിന്റെ ദോഷകരമായ അളവ് നശിപ്പിക്കാനുമുള്ള Ag ഓക്സിസാൾട്ടുകളുടെ കഴിവ് ഇത് വിശദീകരിക്കാനിടയുണ്ട്, കൂടാതെ കൂടുതൽ പഠനം ആവശ്യമാണ്17.
രോഗബാധിതമായ മുറിവുകൾ ഉണങ്ങാത്തത് ഡോക്ടർമാർക്കും രോഗികൾക്കും ഒരു പ്രശ്‌നമാണ്. പല ഡ്രെസ്സിംഗുകളും ആന്റിമൈക്രോബയൽ ഫലപ്രാപ്തി അവകാശപ്പെടുന്നുണ്ടെങ്കിലും, മുറിവിന്റെ സൂക്ഷ്മ പരിസ്ഥിതിയെ സ്വാധീനിക്കുന്ന മറ്റ് പ്രധാന ഘടകങ്ങളിൽ ഗവേഷണം വളരെ അപൂർവമായി മാത്രമേ ശ്രദ്ധ കേന്ദ്രീകരിക്കുന്നുള്ളൂ. വ്യത്യസ്ത സിൽവർ സാങ്കേതികവിദ്യകൾക്ക് വ്യത്യസ്ത ആന്റിമൈക്രോബയൽ ഫലപ്രാപ്തി ഉണ്ടെന്നും, പ്രധാനമായും, അണുബാധയെ ആശ്രയിക്കാതെ, മുറിവ് പരിസ്ഥിതിയിലും രോഗശാന്തിയിലും വ്യത്യസ്ത ഫലങ്ങൾ ഉണ്ടെന്നും ഈ പഠനം കാണിക്കുന്നു. മുറിവ് അണുബാധകളെ ചികിത്സിക്കുന്നതിലും രോഗശാന്തിയെ പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്നതിലും ഈ ഡ്രെസ്സിംഗുകളുടെ ഫലപ്രാപ്തി ഇൻ വിട്രോ, ഇൻ വിവോ പഠനങ്ങൾ കാണിക്കുന്നുണ്ടെങ്കിലും, ക്ലിനിക്കിൽ ഈ ഡ്രെസ്സിംഗുകളുടെ ഫലപ്രാപ്തി വിലയിരുത്തുന്നതിന് ക്രമരഹിതമായ നിയന്ത്രിത പരീക്ഷണങ്ങൾ ആവശ്യമാണ്.
നിലവിലെ പഠനത്തിൽ ഉപയോഗിച്ചതും/അല്ലെങ്കിൽ വിശകലനം ചെയ്തതുമായ ഡാറ്റാസെറ്റുകൾ ന്യായമായ അഭ്യർത്ഥന പ്രകാരം ബന്ധപ്പെട്ട രചയിതാവിൽ നിന്ന് ലഭ്യമാണ്.