മോഡിക് മാറ്റങ്ങളുടെ ഒരു മൃഗ മാതൃക സൃഷ്ടിക്കുന്നതിനായി ലംബർ സബ്കോണ്ട്രൽ അസ്ഥിയിൽ ഓട്ടോലോഗസ് ന്യൂക്ലിയസ് പൾപോസസ് ഇംപ്ലാന്റ് ചെയ്തു.

Nature.com സന്ദർശിച്ചതിന് നന്ദി. നിങ്ങൾ ഉപയോഗിക്കുന്ന ബ്രൗസർ പതിപ്പിന് പരിമിതമായ CSS പിന്തുണ മാത്രമേ ഉള്ളൂ. മികച്ച ഫലങ്ങൾക്കായി, ഒരു പുതിയ ബ്രൗസർ ഉപയോഗിക്കാൻ ഞങ്ങൾ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു (അല്ലെങ്കിൽ ഇന്റർനെറ്റ് എക്സ്പ്ലോററിൽ അനുയോജ്യതാ മോഡ് പ്രവർത്തനരഹിതമാക്കുക). അതേസമയം, തുടർച്ചയായ പിന്തുണ ഉറപ്പാക്കാൻ, സ്റ്റൈലുകളും ജാവാസ്ക്രിപ്റ്റും ഇല്ലാതെ ഞങ്ങൾ സൈറ്റ് പ്രദർശിപ്പിക്കും.
മോഡിക് ചേഞ്ച് (MC) എന്ന മൃഗ മാതൃകകളുടെ സ്ഥാപനം MC പഠിക്കുന്നതിനുള്ള ഒരു പ്രധാന അടിത്തറയാണ്. ന്യൂസിലാൻഡിലെ അമ്പത്തിനാല് വെള്ള മുയലുകളെ ഷാം-ഓപ്പറേഷൻ ഗ്രൂപ്പ്, മസിൽ ഇംപ്ലാന്റേഷൻ ഗ്രൂപ്പ് (ME ഗ്രൂപ്പ്), ന്യൂക്ലിയസ് പൾപോസസ് ഇംപ്ലാന്റേഷൻ ഗ്രൂപ്പ് (NPE ഗ്രൂപ്പ്) എന്നിങ്ങനെ തിരിച്ചിരിക്കുന്നു. NPE ഗ്രൂപ്പിൽ, ഇന്റർവെർടെബ്രൽ ഡിസ്ക് ആന്റീറോലാറ്ററൽ ലംബർ സർജിക്കൽ സമീപനത്തിലൂടെ തുറന്നുകാട്ടുകയും എൻഡ് പ്ലേറ്റിനടുത്തുള്ള L5 വെർട്ടെബ്രൽ ബോഡിയിൽ ഒരു സൂചി ഉപയോഗിച്ച് പഞ്ചർ ചെയ്യുകയും ചെയ്തു. L1/2 ഇന്റർവെർടെബ്രൽ ഡിസ്കിൽ നിന്ന് NP ഒരു സിറിഞ്ച് ഉപയോഗിച്ച് വേർതിരിച്ചെടുത്ത് അതിലേക്ക് കുത്തിവച്ചു. സബ്കോണ്ട്രൽ അസ്ഥിയിൽ ഒരു ദ്വാരം തുരക്കുന്നു. മസിൽ ഇംപ്ലാന്റേഷൻ ഗ്രൂപ്പിലെയും ഷാം-ഓപ്പറേഷൻ ഗ്രൂപ്പിലെയും ശസ്ത്രക്രിയാ നടപടിക്രമങ്ങളും ഡ്രില്ലിംഗ് രീതികളും NP ഇംപ്ലാന്റേഷൻ ഗ്രൂപ്പിലേതിന് സമാനമാണ്. ME ഗ്രൂപ്പിൽ, പേശിയുടെ ഒരു കഷണം ദ്വാരത്തിലേക്ക് സ്ഥാപിച്ചു, അതേസമയം ഷാം-ഓപ്പറേഷൻ ഗ്രൂപ്പിൽ, ദ്വാരത്തിലേക്ക് ഒന്നും സ്ഥാപിച്ചില്ല. ഓപ്പറേഷനുശേഷം, MRI സ്കാനിംഗും മോളിക്യുലാർ ബയോളജിക്കൽ പരിശോധനയും നടത്തി. NPE ഗ്രൂപ്പിലെ സിഗ്നൽ മാറി, പക്ഷേ ഷാം-ഓപ്പറേഷൻ ഗ്രൂപ്പിലും ME ഗ്രൂപ്പിലും വ്യക്തമായ സിഗ്നൽ മാറ്റമൊന്നും ഉണ്ടായില്ല. ഹിസ്റ്റോളജിക്കൽ നിരീക്ഷണത്തിൽ ഇംപ്ലാന്റേഷൻ സ്ഥലത്ത് അസാധാരണമായ ടിഷ്യു വ്യാപനം നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടതായും NPE ഗ്രൂപ്പിൽ IL-4, IL-17, IFN-γ എന്നിവയുടെ എക്സ്പ്രഷൻ വർദ്ധിച്ചതായും കണ്ടെത്തി. സബ്കോണ്ട്രൽ അസ്ഥിയിൽ NP ഇംപ്ലാന്റേഷൻ ചെയ്യുന്നത് MC യുടെ ഒരു മൃഗ മാതൃക രൂപപ്പെടുത്തും.
മാഗ്നറ്റിക് റെസൊണൻസ് ഇമേജിംഗിൽ (MRI) ദൃശ്യമാകുന്ന വെർട്ടെബ്രൽ എൻഡ്‌പ്ലേറ്റുകളുടെയും തൊട്ടടുത്തുള്ള അസ്ഥിമജ്ജയുടെയും മുറിവുകളാണ് മോഡിക് മാറ്റങ്ങൾ (MC). അനുബന്ധ ലക്ഷണങ്ങളുള്ള വ്യക്തികളിൽ ഇവ വളരെ സാധാരണമാണ്1. താഴ്ന്ന നടുവേദനയുമായി (LBP) ബന്ധപ്പെട്ടതിനാൽ MC യുടെ പ്രാധാന്യം പല പഠനങ്ങളും ഊന്നിപ്പറഞ്ഞിട്ടുണ്ട്2,3. ഡി റൂസ് തുടങ്ങിയവർ 4 ഉം മോഡിക് തുടങ്ങിയവർ 5 ഉം വെർട്ടെബ്രൽ അസ്ഥിമജ്ജയിലെ മൂന്ന് വ്യത്യസ്ത തരം സബ്‌കോണ്ട്രൽ സിഗ്നൽ അസാധാരണത്വങ്ങളെ സ്വതന്ത്രമായി ആദ്യം വിവരിച്ചു. T1-വെയ്റ്റഡ് (T1W) സീക്വൻസുകളിൽ മോഡിക് ടൈപ്പ് I മാറ്റങ്ങൾ ഹൈപ്പിന്റൻസും T2-വെയ്റ്റഡ് (T2W) സീക്വൻസുകളിൽ ഹൈപ്പിന്റൻസുമാണ്. ഈ മുറിവ് അസ്ഥിമജ്ജയിലെ ഫിഷർ എൻഡ്‌പ്ലേറ്റുകളും തൊട്ടടുത്തുള്ള വാസ്കുലർ ഗ്രാനുലേഷൻ ടിഷ്യുവും വെളിപ്പെടുത്തുന്നു. T1W, T2W സീക്വൻസുകളിൽ മോഡിക് ടൈപ്പ് II മാറ്റങ്ങൾ ഉയർന്ന സിഗ്നൽ കാണിക്കുന്നു. ഇത്തരത്തിലുള്ള നിഖേദ് കണ്ടെത്താനാകും, അതുപോലെ തന്നെ അടുത്തുള്ള അസ്ഥിമജ്ജയുടെ ഹിസ്റ്റോളജിക്കൽ ഫാറ്റി റീപ്ലേസ്‌മെന്റും. മോഡിക് ടൈപ്പ് III മാറ്റങ്ങൾ T1W, T2W സീക്വൻസുകളിൽ കുറഞ്ഞ സിഗ്നൽ കാണിക്കുന്നു. എൻഡ്‌പ്ലേറ്റുകളുമായി ബന്ധപ്പെട്ട സ്ക്ലെറോട്ടിക് നിഖേദങ്ങൾ നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടിട്ടുണ്ട്6. നട്ടെല്ലിന്റെ ഒരു രോഗാവസ്ഥാ രോഗമായി MC കണക്കാക്കപ്പെടുന്നു, കൂടാതെ നട്ടെല്ലിന്റെ പല ഡീജനറേറ്റീവ് രോഗങ്ങളുമായി ഇത് അടുത്ത ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു7,8,9.
ലഭ്യമായ ഡാറ്റ കണക്കിലെടുത്ത്, നിരവധി പഠനങ്ങൾ MC യുടെ എറ്റിയോളജി, പാത്തോളജിക്കൽ മെക്കാനിസങ്ങൾ എന്നിവയെക്കുറിച്ച് വിശദമായ ഉൾക്കാഴ്ചകൾ നൽകിയിട്ടുണ്ട്. ആൽബർട്ട് തുടങ്ങിയവർ MC ഡിസ്ക് ഹെർണിയേഷൻ മൂലമാകാമെന്ന് അഭിപ്രായപ്പെട്ടു8. ഹു തുടങ്ങിയവർ MC യെ ഗുരുതരമായ ഡിസ്ക് ഡീജനറേഷൻ എന്ന് വിശേഷിപ്പിച്ചു10. ക്രോക്ക് "ആന്തരിക ഡിസ്ക് വിള്ളൽ" എന്ന ആശയം മുന്നോട്ടുവച്ചു, ഇത് ആവർത്തിച്ചുള്ള ഡിസ്ക് ട്രോമ എൻഡ്പ്ലേറ്റിൽ മൈക്രോടിയേഴ്സിന് കാരണമായേക്കാമെന്ന് പ്രസ്താവിക്കുന്നു. പിളർപ്പ് രൂപീകരണത്തിനുശേഷം, ന്യൂക്ലിയസ് പൾപോസസ് (NP) മൂലമുണ്ടാകുന്ന എൻഡ്പ്ലേറ്റിന്റെ നാശം ഒരു ഓട്ടോഇമ്മ്യൂൺ പ്രതികരണത്തിന് കാരണമായേക്കാം, ഇത് MC11 ന്റെ വികാസത്തിലേക്ക് നയിക്കുന്നു. മാ തുടങ്ങിയവർ സമാനമായ ഒരു വീക്ഷണം പങ്കുവെക്കുകയും MC12 ന്റെ രോഗകാരിയിൽ NP-ഇൻഡ്യൂസ്ഡ് ഓട്ടോഇമ്മ്യൂണിറ്റി ഒരു പ്രധാന പങ്ക് വഹിക്കുന്നുണ്ടെന്ന് റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യുകയും ചെയ്തു.
രോഗപ്രതിരോധ സംവിധാനത്തിലെ കോശങ്ങൾ, പ്രത്യേകിച്ച് CD4+ T സഹായി ലിംഫോസൈറ്റുകൾ, ഓട്ടോഇമ്മ്യൂണിറ്റിയുടെ രോഗകാരികളിൽ നിർണായക പങ്ക് വഹിക്കുന്നു13. അടുത്തിടെ കണ്ടെത്തിയ Th17 ഉപവിഭാഗം പ്രോഇൻഫ്ലമേറ്ററി സൈറ്റോകൈൻ IL-17 ഉത്പാദിപ്പിക്കുകയും, കീമോകൈൻ എക്സ്പ്രഷൻ പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുകയും, കേടായ അവയവങ്ങളിലെ T കോശങ്ങളെ IFN-γ14 ഉത്പാദിപ്പിക്കാൻ ഉത്തേജിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു. രോഗപ്രതിരോധ പ്രതികരണങ്ങളുടെ രോഗകാരികളിൽ Th2 കോശങ്ങൾ സവിശേഷമായ പങ്ക് വഹിക്കുന്നു. ഒരു പ്രതിനിധി Th2 സെല്ലായി IL-4 പ്രകടിപ്പിക്കുന്നത് ഗുരുതരമായ രോഗപ്രതിരോധ പ്രത്യാഘാതങ്ങൾക്ക് കാരണമാകും15.
MC16,17,18,19,20,21,22,23,24 എന്നിവയെക്കുറിച്ച് നിരവധി ക്ലിനിക്കൽ പഠനങ്ങൾ നടത്തിയിട്ടുണ്ടെങ്കിലും, മനുഷ്യരിൽ പതിവായി സംഭവിക്കുന്ന MC പ്രക്രിയയെ അനുകരിക്കാൻ കഴിയുന്നതും എറ്റിയോളജി അന്വേഷിക്കുന്നതിനോ ടാർഗെറ്റുചെയ്‌ത തെറാപ്പി പോലുള്ള പുതിയ ചികിത്സകൾക്കോ ​​ഉപയോഗിക്കാൻ കഴിയുന്ന അനുയോജ്യമായ മൃഗ പരീക്ഷണ മാതൃകകളുടെ അഭാവം ഇപ്പോഴും നിലനിൽക്കുന്നു. ഇന്നുവരെ, അടിസ്ഥാന പാത്തോളജിക്കൽ സംവിധാനങ്ങൾ പഠിക്കുന്നതിനായി MC യുടെ കുറച്ച് മൃഗ മാതൃകകൾ മാത്രമേ റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യപ്പെട്ടിട്ടുള്ളൂ.
ആൽബെർട്ടും മായും മുന്നോട്ടുവച്ച ഓട്ടോഇമ്മ്യൂൺ സിദ്ധാന്തത്തെ അടിസ്ഥാനമാക്കി, ഡ്രിൽ ചെയ്ത വെർട്ടെബ്രൽ എൻഡ് പ്ലേറ്റിന് സമീപം NP ഓട്ടോട്രാൻസ്പ്ലാന്റേഷൻ ചെയ്തുകൊണ്ട് ലളിതവും പുനരുൽപ്പാദിപ്പിക്കാവുന്നതുമായ ഒരു മുയൽ MC മാതൃക ഈ പഠനം സ്ഥാപിച്ചു. മൃഗ മാതൃകകളുടെ ഹിസ്റ്റോളജിക്കൽ സവിശേഷതകൾ നിരീക്ഷിക്കുകയും MC യുടെ വികസനത്തിൽ NP യുടെ പ്രത്യേക സംവിധാനങ്ങൾ വിലയിരുത്തുകയും ചെയ്യുക എന്നതാണ് മറ്റ് ലക്ഷ്യങ്ങൾ. ഇതിനായി, MC യുടെ പുരോഗതി പഠിക്കാൻ മോളിക്യുലാർ ബയോളജി, MRI, ഹിസ്റ്റോളജിക്കൽ പഠനങ്ങൾ തുടങ്ങിയ സാങ്കേതിക വിദ്യകൾ ഞങ്ങൾ ഉപയോഗിക്കുന്നു.
ശസ്ത്രക്രിയയ്ക്കിടെ രക്തസ്രാവം മൂലം രണ്ട് മുയലുകൾ ചത്തു, എംആർഐ സമയത്ത് അനസ്തേഷ്യ നൽകുന്നതിനിടെ നാല് മുയലുകൾ ചത്തു. ശേഷിക്കുന്ന 48 മുയലുകൾ അതിജീവിച്ചു, ശസ്ത്രക്രിയയ്ക്കുശേഷം പെരുമാറ്റപരമോ നാഡീസംബന്ധമായതോ ആയ ലക്ഷണങ്ങളൊന്നും കാണിച്ചില്ല.
വ്യത്യസ്ത ദ്വാരങ്ങളിൽ ഉൾച്ചേർത്ത ടിഷ്യുവിന്റെ സിഗ്നൽ തീവ്രത വ്യത്യസ്തമാണെന്ന് MRI കാണിക്കുന്നു. NPE ഗ്രൂപ്പിലെ L5 വെർട്ടെബ്രൽ ബോഡിയുടെ സിഗ്നൽ തീവ്രത ഇൻസേർഷന് ശേഷം 12, 16, 20 ആഴ്ചകളിൽ ക്രമേണ മാറി (T1W ശ്രേണി കുറഞ്ഞ സിഗ്നൽ കാണിച്ചു, T2W ശ്രേണി മിക്സഡ് സിഗ്നലും കുറഞ്ഞ സിഗ്നലും കാണിച്ചു) (ചിത്രം 1C), അതേസമയം മറ്റ് രണ്ട് ഗ്രൂപ്പുകളുടെ എംബഡഡ് ഭാഗങ്ങളുടെ MRI ദൃശ്യങ്ങൾ അതേ കാലയളവിൽ താരതമ്യേന സ്ഥിരത പുലർത്തി (ചിത്രം 1A, B).
(എ) മുയലിന്റെ ലംബർ നട്ടെല്ലിന്റെ 3 സമയ പോയിന്റുകളിൽ പ്രതിനിധി തുടർച്ചയായ എംആർഐകൾ. ഷാം-ഓപ്പറേഷൻ ഗ്രൂപ്പിന്റെ ചിത്രങ്ങളിൽ സിഗ്നൽ അസാധാരണത്വങ്ങളൊന്നും കണ്ടെത്തിയില്ല. (ബി) ME ഗ്രൂപ്പിലെ വെർട്ടെബ്രൽ ബോഡിയുടെ സിഗ്നൽ സവിശേഷതകൾ ഷാം-ഓപ്പറേഷൻ ഗ്രൂപ്പിലേതിന് സമാനമാണ്, കൂടാതെ എംബെഡിംഗ് സൈറ്റിൽ കാലക്രമേണ കാര്യമായ സിഗ്നൽ മാറ്റമൊന്നും നിരീക്ഷിക്കപ്പെടുന്നില്ല. (സി) NPE ഗ്രൂപ്പിൽ, T1W ശ്രേണിയിൽ താഴ്ന്ന സിഗ്നൽ വ്യക്തമായി കാണാം, കൂടാതെ T2W ശ്രേണിയിൽ മിക്സഡ് സിഗ്നലും താഴ്ന്ന സിഗ്നലും വ്യക്തമായി കാണാം. 12 ആഴ്ച കാലയളവ് മുതൽ 20 ആഴ്ച കാലയളവ് വരെ, T2W ശ്രേണിയിലെ താഴ്ന്ന സിഗ്നലുകളെ ചുറ്റിപ്പറ്റിയുള്ള ഇടയ്ക്കിടെയുള്ള ഉയർന്ന സിഗ്നലുകൾ കുറയുന്നു.
NPE ഗ്രൂപ്പിലെ വെർട്ടെബ്രൽ ബോഡിയുടെ ഇംപ്ലാന്റേഷൻ സ്ഥലത്ത് വ്യക്തമായ അസ്ഥി ഹൈപ്പർപ്ലാസിയ കാണാൻ കഴിയും, കൂടാതെ NPE ഗ്രൂപ്പുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ 12 മുതൽ 20 ആഴ്ച വരെ (ചിത്രം 2C) വേഗത്തിൽ അസ്ഥി ഹൈപ്പർപ്ലാസിയ സംഭവിക്കുന്നു, മാതൃകാപരമായ വെർട്ടെബ്രൽ ബോഡികളിൽ കാര്യമായ മാറ്റമൊന്നും കാണപ്പെടുന്നില്ല; ഷാം ഗ്രൂപ്പും ME ഗ്രൂപ്പും (ചിത്രം 2C) 2A,B).
(എ) ഇംപ്ലാന്റ് ചെയ്ത ഭാഗത്തെ വെർട്ടെബ്രൽ ബോഡിയുടെ ഉപരിതലം വളരെ മിനുസമാർന്നതാണ്, ദ്വാരം നന്നായി സുഖപ്പെടുന്നു, വെർട്ടെബ്രൽ ബോഡിയിൽ ഹൈപ്പർപ്ലാസിയ ഇല്ല. (ബി) എംഇ ഗ്രൂപ്പിലെ ഇംപ്ലാന്റ് ചെയ്ത സൈറ്റിന്റെ ആകൃതി വ്യാജ ഓപ്പറേഷൻ ഗ്രൂപ്പിലേതിന് സമാനമാണ്, കൂടാതെ കാലക്രമേണ ഇംപ്ലാന്റ് ചെയ്ത സൈറ്റിന്റെ രൂപത്തിൽ വ്യക്തമായ മാറ്റമൊന്നുമില്ല. (സി) എൻപിഇ ഗ്രൂപ്പിലെ ഇംപ്ലാന്റ് ചെയ്ത സ്ഥലത്ത് ബോൺ ഹൈപ്പർപ്ലാസിയ സംഭവിച്ചു. ബോൺ ഹൈപ്പർപ്ലാസിയ വേഗത്തിൽ വർദ്ധിക്കുകയും ഇന്റർവെർടെബ്രൽ ഡിസ്കിലൂടെ കോൺട്രാലാറ്ററൽ വെർട്ടെബ്രൽ ബോഡിയിലേക്ക് വ്യാപിക്കുകയും ചെയ്തു.
അസ്ഥി രൂപീകരണത്തെക്കുറിച്ച് കൂടുതൽ വിശദമായ വിവരങ്ങൾ ഹിസ്റ്റോളജിക്കൽ വിശകലനം നൽകുന്നു. എച്ച് & ഇ ഉപയോഗിച്ച് സ്റ്റെയിൻ ചെയ്ത ശസ്ത്രക്രിയാനന്തര വിഭാഗങ്ങളുടെ ഫോട്ടോഗ്രാഫുകൾ ചിത്രം 3 കാണിക്കുന്നു. ഷാം-ഓപ്പറേഷൻ ഗ്രൂപ്പിൽ, കോണ്ട്രോസൈറ്റുകൾ നന്നായി ക്രമീകരിച്ചിരുന്നു, കോശ വ്യാപനം കണ്ടെത്തിയില്ല (ചിത്രം 3A). ME ഗ്രൂപ്പിലെ സാഹചര്യം ഷാം-ഓപ്പറേഷൻ ഗ്രൂപ്പിലേതിന് സമാനമായിരുന്നു (ചിത്രം 3B). എന്നിരുന്നാലും, NPE ഗ്രൂപ്പിൽ, ഇംപ്ലാന്റേഷൻ സൈറ്റിൽ ധാരാളം കോണ്ട്രോസൈറ്റുകളും NP പോലുള്ള കോശങ്ങളുടെ വ്യാപനവും നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടു (ചിത്രം 3C);
(എ) എൻഡ് പ്ലേറ്റിനടുത്ത് ട്രാബെക്കുലകൾ കാണാം, കോണ്ട്രോസൈറ്റുകൾ വൃത്തിയായി ക്രമീകരിച്ചിരിക്കുന്നു, ഏകീകൃത കോശ വലുപ്പത്തിലും ആകൃതിയിലും വ്യാപനമില്ല (40 തവണ). (ബി) ME ഗ്രൂപ്പിലെ ഇംപ്ലാന്റേഷൻ സൈറ്റിന്റെ അവസ്ഥ ഷാം ഗ്രൂപ്പിന്റേതിന് സമാനമാണ്. ട്രാബെക്കുലകളും കോണ്ട്രോസൈറ്റുകളും കാണാൻ കഴിയും, പക്ഷേ ഇംപ്ലാന്റേഷൻ സൈറ്റിൽ വ്യക്തമായ വ്യാപനമില്ല (40 തവണ). (ബി) കോണ്ട്രോസൈറ്റുകളും NP പോലുള്ള കോശങ്ങളും ഗണ്യമായി വർദ്ധിക്കുന്നതായി കാണാൻ കഴിയും, കോണ്ട്രോസൈറ്റുകളുടെ ആകൃതിയും വലുപ്പവും അസമമാണ് (40 തവണ).
NPE, ME ഗ്രൂപ്പുകളിൽ ഇന്റർല്യൂക്കിൻ 4 (IL-4) mRNA, ഇന്റർല്യൂക്കിൻ 17 (IL-17) mRNA, ഇന്റർഫെറോൺ γ (IFN-γ) mRNA എന്നിവയുടെ എക്സ്പ്രഷൻ നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടു. ടാർഗെറ്റ് ജീനുകളുടെ എക്സ്പ്രഷൻ ലെവലുകൾ താരതമ്യം ചെയ്തപ്പോൾ, ME ഗ്രൂപ്പിന്റെയും ഷാം ഓപ്പറേഷൻ ഗ്രൂപ്പിന്റെയും ജീൻ എക്സ്പ്രഷനുകളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ NPE ഗ്രൂപ്പിൽ IL-4, IL-17, IFN-γ എന്നിവയുടെ ജീൻ എക്സ്പ്രഷനുകൾ ഗണ്യമായി വർദ്ധിച്ചു (ചിത്രം 4) (P < 0.05). ഷാം ഓപ്പറേഷൻ ഗ്രൂപ്പുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, ME ഗ്രൂപ്പിലെ IL-4, IL-17, IFN-γ എന്നിവയുടെ എക്സ്പ്രഷൻ ലെവലുകൾ അല്പം മാത്രമേ വർദ്ധിച്ചുള്ളൂ, സ്റ്റാറ്റിസ്റ്റിക്കൽ മാറ്റത്തിൽ എത്തിയില്ല (P > 0.05).
NPE ഗ്രൂപ്പിലെ IL-4, IL-17, IFN-γ എന്നിവയുടെ mRNA എക്സ്പ്രഷൻ, ഷാം ഓപ്പറേഷൻ ഗ്രൂപ്പിലും ME ഗ്രൂപ്പിലും ഉള്ളതിനേക്കാൾ വളരെ ഉയർന്ന പ്രവണത കാണിച്ചു (P < 0.05).
ഇതിനു വിപരീതമായി, ME ഗ്രൂപ്പിലെ എക്സ്പ്രഷൻ ലെവലുകളിൽ കാര്യമായ വ്യത്യാസമൊന്നും കാണിച്ചില്ല (P> 0.05).
മാറ്റം വരുത്തിയ mRNA എക്സ്പ്രഷൻ പാറ്റേൺ സ്ഥിരീകരിക്കുന്നതിന്, IL-4, IL-17 എന്നിവയ്‌ക്കെതിരെ വാണിജ്യപരമായി ലഭ്യമായ ആന്റിബോഡികൾ ഉപയോഗിച്ച് വെസ്റ്റേൺ ബ്ലോട്ട് വിശകലനം നടത്തി. ME ഗ്രൂപ്പുമായും ഷാം ഓപ്പറേഷൻ ഗ്രൂപ്പുമായും താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, ചിത്രം 5A,B-യിൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നതുപോലെ, NPE ഗ്രൂപ്പിലെ IL-4, IL-17 എന്നിവയുടെ പ്രോട്ടീൻ അളവ് ഗണ്യമായി വർദ്ധിച്ചു (P < 0.05). ഷാം ഓപ്പറേഷൻ ഗ്രൂപ്പുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, ME ഗ്രൂപ്പിലെ IL-4, IL-17 എന്നിവയുടെ പ്രോട്ടീൻ അളവുകളും സ്ഥിതിവിവരക്കണക്കനുസരിച്ച് കാര്യമായ മാറ്റങ്ങളിൽ എത്തുന്നതിൽ പരാജയപ്പെട്ടു (P> 0.05).
(എ) NPE ഗ്രൂപ്പിലെ IL-4, IL-17 എന്നിവയുടെ പ്രോട്ടീൻ അളവ് ME ഗ്രൂപ്പിലെയും പ്ലാസിബോ ഗ്രൂപ്പിലെയും (P < 0.05) അപേക്ഷിച്ച് വളരെ കൂടുതലായിരുന്നു. (ബി) വെസ്റ്റേൺ ബ്ലോട്ട് ഹിസ്റ്റോഗ്രാം.
ശസ്ത്രക്രിയയ്ക്കിടെ ലഭിച്ച മനുഷ്യ സാമ്പിളുകളുടെ എണ്ണം പരിമിതമായതിനാൽ, MC യുടെ രോഗകാരിയെക്കുറിച്ചുള്ള വ്യക്തവും വിശദവുമായ പഠനങ്ങൾ അൽപ്പം ബുദ്ധിമുട്ടാണ്. MC യുടെ സാധ്യതയുള്ള രോഗകാരി സംവിധാനങ്ങൾ പഠിക്കുന്നതിനായി അതിന്റെ ഒരു മൃഗ മാതൃക സ്ഥാപിക്കാൻ ഞങ്ങൾ ശ്രമിച്ചു. അതേസമയം, NP ഓട്ടോഗ്രാഫ്റ്റ് വഴി പ്രേരിപ്പിച്ച MC യുടെ ഗതി പിന്തുടരാൻ റേഡിയോളജിക്കൽ മൂല്യനിർണ്ണയം, ഹിസ്റ്റോളജിക്കൽ മൂല്യനിർണ്ണയം, മോളിക്യുലാർ ബയോളജിക്കൽ മൂല്യനിർണ്ണയം എന്നിവ ഉപയോഗിച്ചു. തൽഫലമായി, NP ഇംപ്ലാന്റേഷൻ മോഡൽ 12 ആഴ്ചയിൽ നിന്ന് 20 ആഴ്ച സമയ പോയിന്റുകളിലേക്ക് സിഗ്നൽ തീവ്രതയിൽ ക്രമേണ മാറ്റം വരുത്തി (T1W സീക്വൻസുകളിൽ കുറഞ്ഞ സിഗ്നലും T2W സീക്വൻസുകളിൽ കുറഞ്ഞ സിഗ്നലും), ഇത് ടിഷ്യു മാറ്റങ്ങളെ സൂചിപ്പിക്കുന്നു, കൂടാതെ ഹിസ്റ്റോളജിക്കൽ, മോളിക്യുലാർ ബയോളജിക്കൽ വിലയിരുത്തലുകൾ റേഡിയോളജിക്കൽ പഠനത്തിന്റെ ഫലങ്ങൾ സ്ഥിരീകരിച്ചു.
ഈ പരീക്ഷണത്തിന്റെ ഫലങ്ങൾ കാണിക്കുന്നത് NPE ഗ്രൂപ്പിലെ വെർട്ടെബ്രൽ ബോഡി ലംഘന സ്ഥലത്ത് ദൃശ്യപരവും ഹിസ്റ്റോളജിക്കൽ മാറ്റങ്ങളും സംഭവിച്ചു എന്നാണ്. അതേസമയം, IL-4, IL-17, IFN-γ ജീനുകളുടെയും IL-4, IL-17, IFN-γ എന്നിവയുടെയും പ്രകടനവും നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടു, ഇത് വെർട്ടെബ്രൽ ബോഡിയിലെ ഓട്ടോലോഗസ് ന്യൂക്ലിയസ് പൾപോസസ് ടിഷ്യുവിന്റെ ലംഘനം നിരവധി സിഗ്നൽ, രൂപാന്തര മാറ്റങ്ങൾക്ക് കാരണമായേക്കാമെന്ന് സൂചിപ്പിക്കുന്നു. മൃഗ മാതൃകയുടെ വെർട്ടെബ്രൽ ബോഡികളുടെ സിഗ്നൽ സവിശേഷതകൾ (T1W ശ്രേണിയിലെ കുറഞ്ഞ സിഗ്നൽ, T2W ശ്രേണിയിലെ മിക്സഡ് സിഗ്നൽ, കുറഞ്ഞ സിഗ്നൽ) മനുഷ്യ വെർട്ടെബ്രൽ കോശങ്ങളുടേതിന് സമാനമാണെന്ന് കണ്ടെത്താൻ എളുപ്പമാണ്, കൂടാതെ MRI സ്വഭാവസവിശേഷതകൾ ഹിസ്റ്റോളജിയുടെയും മൊത്ത ശരീരഘടനയുടെയും നിരീക്ഷണങ്ങളെ സ്ഥിരീകരിക്കുന്നു, അതായത്, വെർട്ടെബ്രൽ ബോഡി കോശങ്ങളിലെ മാറ്റങ്ങൾ പുരോഗമനപരമാണ്. അക്യൂട്ട് ട്രോമ മൂലമുണ്ടാകുന്ന കോശജ്വലന പ്രതികരണം പഞ്ചറിന് തൊട്ടുപിന്നാലെ പ്രത്യക്ഷപ്പെടാമെങ്കിലും, പഞ്ചറിന് 12 ആഴ്ചകൾക്ക് ശേഷം ക്രമേണ വർദ്ധിച്ചുവരുന്ന സിഗ്നൽ മാറ്റങ്ങൾ പ്രത്യക്ഷപ്പെടുകയും MRI മാറ്റങ്ങളുടെ വീണ്ടെടുക്കലിന്റെയോ വിപരീതഫലത്തിന്റെയോ ലക്ഷണങ്ങളില്ലാതെ 20 ആഴ്ച വരെ തുടരുകയും ചെയ്തുവെന്ന് MRI ഫലങ്ങൾ കാണിച്ചു. മുയലുകളിൽ പുരോഗമനപരമായ MV സ്ഥാപിക്കുന്നതിനുള്ള ഒരു വിശ്വസനീയമായ രീതിയാണ് ഓട്ടോലോഗസ് വെർട്ടെബ്രൽ NP എന്ന് ഈ ഫലങ്ങൾ സൂചിപ്പിക്കുന്നു.
ഈ പഞ്ചർ മോഡലിന് മതിയായ വൈദഗ്ധ്യം, സമയം, ശസ്ത്രക്രിയാ ശ്രമം എന്നിവ ആവശ്യമാണ്. പ്രാഥമിക പരീക്ഷണങ്ങളിൽ, പാരാവെർടെബ്രൽ ലിഗമെന്റസ് ഘടനകളുടെ വിഘടനം അല്ലെങ്കിൽ അമിതമായ ഉത്തേജനം വെർട്ടെബ്രൽ ഓസ്റ്റിയോഫൈറ്റുകൾ രൂപപ്പെടുന്നതിന് കാരണമായേക്കാം. അടുത്തുള്ള ഡിസ്കുകൾക്ക് കേടുപാടുകൾ വരുത്തുകയോ പ്രകോപിപ്പിക്കുകയോ ചെയ്യാതിരിക്കാൻ ശ്രദ്ധിക്കണം. സ്ഥിരവും പുനരുൽപ്പാദിപ്പിക്കാവുന്നതുമായ ഫലങ്ങൾ ലഭിക്കുന്നതിന് നുഴഞ്ഞുകയറ്റത്തിന്റെ ആഴം നിയന്ത്രിക്കേണ്ടതിനാൽ, 3 മില്ലീമീറ്റർ നീളമുള്ള ഒരു സൂചിയുടെ കവചം മുറിച്ചുമാറ്റി ഞങ്ങൾ സ്വമേധയാ ഒരു പ്ലഗ് ഉണ്ടാക്കി. ഈ പ്ലഗ് ഉപയോഗിക്കുന്നത് വെർട്ടെബ്രൽ ബോഡിയിൽ ഏകീകൃത ഡ്രില്ലിംഗ് ആഴം ഉറപ്പാക്കുന്നു. പ്രാഥമിക പരീക്ഷണങ്ങളിൽ, ഓപ്പറേഷനിൽ ഉൾപ്പെട്ട മൂന്ന് ഓർത്തോപീഡിക് സർജന്മാർ 18-ഗേജ് സൂചികളേക്കാളും മറ്റ് രീതികളേക്കാളും 16-ഗേജ് സൂചികൾ ഉപയോഗിച്ച് പ്രവർത്തിക്കാൻ എളുപ്പമാണെന്ന് കണ്ടെത്തി. ഡ്രില്ലിംഗ് സമയത്ത് അമിത രക്തസ്രാവം ഒഴിവാക്കാൻ, സൂചി കുറച്ചുനേരം നിശ്ചലമായി പിടിക്കുന്നത് കൂടുതൽ അനുയോജ്യമായ ഇൻസേർഷൻ ഹോൾ നൽകും, ഇത് ഒരു നിശ്ചിത അളവിലുള്ള MC ഈ രീതിയിൽ നിയന്ത്രിക്കാൻ കഴിയുമെന്ന് സൂചിപ്പിക്കുന്നു.
നിരവധി പഠനങ്ങൾ MC-യെ ലക്ഷ്യം വച്ചുള്ളതാണെങ്കിലും, MC25,26,27-ന്റെ എറ്റിയോളജി, രോഗകാരി എന്നിവയെക്കുറിച്ച് വളരെക്കുറച്ചേ അറിയൂ. ഞങ്ങളുടെ മുൻ പഠനങ്ങളെ അടിസ്ഥാനമാക്കി, MC12-ന്റെ സംഭവവികാസത്തിലും വികാസത്തിലും ഓട്ടോഇമ്മ്യൂണിറ്റി ഒരു പ്രധാന പങ്ക് വഹിക്കുന്നുണ്ടെന്ന് ഞങ്ങൾ കണ്ടെത്തി. ആന്റിജൻ ഉത്തേജനത്തിനു ശേഷമുള്ള CD4+ കോശങ്ങളുടെ പ്രധാന വ്യത്യാസ പാതകളായ IL-4, IL-17, IFN-γ എന്നിവയുടെ അളവ് പ്രകടനമാണ് ഈ പഠനം പരിശോധിച്ചത്. ഞങ്ങളുടെ പഠനത്തിൽ, നെഗറ്റീവ് ഗ്രൂപ്പുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, NPE ഗ്രൂപ്പിന് IL-4, IL-17, IFN-γ എന്നിവയുടെ ഉയർന്ന പ്രകടനമുണ്ടായിരുന്നു, കൂടാതെ IL-4, IL-17 എന്നിവയുടെ പ്രോട്ടീൻ അളവുകളും കൂടുതലായിരുന്നു.
ക്ലിനിക്കലായി, ഡിസ്ക് ഹെർണിയേഷൻ ഉള്ള രോഗികളിൽ നിന്നുള്ള NP കോശങ്ങളിൽ IL-17 mRNA എക്സ്പ്രഷൻ വർദ്ധിക്കുന്നു28. ആരോഗ്യകരമായ നിയന്ത്രണങ്ങളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ അക്യൂട്ട് നോൺ-കംപ്രസ്സീവ് ഡിസ്ക് ഹെർണിയേഷൻ മോഡലിലും വർദ്ധിച്ച IL-4, IFN-γ എക്സ്പ്രഷൻ ലെവലുകൾ കണ്ടെത്തി29. IL-17 വീക്കം, ഓട്ടോഇമ്മ്യൂൺ രോഗങ്ങളിൽ ടിഷ്യു പരിക്ക് എന്നിവയിൽ ഒരു പ്രധാന പങ്ക് വഹിക്കുന്നു30 കൂടാതെ IFN-γ31 നുള്ള രോഗപ്രതിരോധ പ്രതികരണം വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നു. MRL/lpr എലികളിലും ഓട്ടോഇമ്മ്യൂണിറ്റി-സസെപ്റ്റബിൾ എലികളിലും IL-17-മധ്യസ്ഥതയുള്ള ടിഷ്യു പരിക്ക് മെച്ചപ്പെടുത്തിയതായി റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യപ്പെട്ടിട്ടുണ്ട്32. IL-4 ന് പ്രോഇൻഫ്ലമേറ്ററി സൈറ്റോകൈനുകളുടെ (IL-1β, TNFα പോലുള്ളവ) പ്രകടനത്തെയും മാക്രോഫേജ് ആക്റ്റിവേഷനെയും തടയാൻ കഴിയും34. ഒരേ സമയത്ത് IL-17, IFN-γ എന്നിവയുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ NPE ഗ്രൂപ്പിൽ IL-4 ന്റെ mRNA എക്സ്പ്രഷൻ വ്യത്യസ്തമായിരുന്നുവെന്ന് റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യപ്പെട്ടു; NPE ഗ്രൂപ്പിലെ IFN-γ യുടെ mRNA എക്സ്പ്രഷൻ മറ്റ് ഗ്രൂപ്പുകളേക്കാൾ വളരെ കൂടുതലായിരുന്നു. അതിനാൽ, NP ഇന്റർകലേഷൻ മൂലമുണ്ടാകുന്ന കോശജ്വലന പ്രതികരണത്തിന്റെ ഒരു മധ്യസ്ഥനായിരിക്കാം IFN-γ ഉത്പാദനം. സജീവമാക്കിയ ടൈപ്പ് 1 ഹെൽപ്പർ ടി സെല്ലുകൾ, നാച്ചുറൽ കില്ലർ സെല്ലുകൾ, മാക്രോഫേജുകൾ എന്നിവയുൾപ്പെടെ ഒന്നിലധികം കോശ തരങ്ങളാൽ IFN-γ ഉത്പാദിപ്പിക്കപ്പെടുന്നുവെന്ന് പഠനങ്ങൾ തെളിയിച്ചിട്ടുണ്ട്35,36, കൂടാതെ രോഗപ്രതിരോധ പ്രതികരണങ്ങളെ പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്ന ഒരു പ്രധാന പ്രോ-ഇൻഫ്ലമേറ്ററി സൈറ്റോകൈനാണ്37.
ഈ പഠനം സൂചിപ്പിക്കുന്നത് MC യുടെ സംഭവത്തിലും വികാസത്തിലും ഓട്ടോഇമ്മ്യൂൺ പ്രതികരണം ഉൾപ്പെട്ടിരിക്കാമെന്നാണ്. MRI-യിൽ MC-യുടെയും പ്രമുഖ NP-യുടെയും സിഗ്നൽ സവിശേഷതകൾ സമാനമാണെന്നും T2W ശ്രേണിയിൽ ഇവ രണ്ടും ഉയർന്ന സിഗ്നൽ കാണിക്കുന്നുണ്ടെന്നും ലുവോമ തുടങ്ങിയവർ കണ്ടെത്തി38. IL-139 പോലുള്ള ചില സൈറ്റോകൈനുകൾ MC യുടെ സംഭവവികാസവുമായി അടുത്ത ബന്ധമുള്ളതായി സ്ഥിരീകരിച്ചിട്ടുണ്ട്. NP യുടെ മുകളിലേക്കോ താഴേക്കോ നീണ്ടുനിൽക്കുന്നത് MC12 ന്റെ സംഭവവികാസത്തിലും വികാസത്തിലും വലിയ സ്വാധീനം ചെലുത്തുമെന്ന് Ma തുടങ്ങിയവർ അഭിപ്രായപ്പെട്ടു. ജനനം മുതൽ വാസ്കുലർ രക്തചംക്രമണത്തിലേക്ക് പ്രവേശിക്കാൻ കഴിയാത്ത ഒരു രോഗപ്രതിരോധ ശേഷിയില്ലാത്ത ടിഷ്യുവാണ് NP എന്ന് ബോബെച്ച്കോ40 ഉം ഹെർസ്ബീൻ തുടങ്ങിയവർ 41 ഉം റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തു. NP പ്രോട്രഷനുകൾ രക്ത വിതരണത്തിലേക്ക് വിദേശ വസ്തുക്കളെ അവതരിപ്പിക്കുന്നു, അതുവഴി പ്രാദേശിക ഓട്ടോഇമ്മ്യൂൺ പ്രതിപ്രവർത്തനങ്ങൾക്ക് മധ്യസ്ഥത വഹിക്കുന്നു42. ഓട്ടോഇമ്മ്യൂൺ പ്രതിപ്രവർത്തനങ്ങൾക്ക് ധാരാളം രോഗപ്രതിരോധ ഘടകങ്ങളെ പ്രേരിപ്പിക്കാൻ കഴിയും, കൂടാതെ ഈ ഘടകങ്ങൾ ടിഷ്യൂകളിലേക്ക് തുടർച്ചയായി സമ്പർക്കം പുലർത്തുമ്പോൾ, അവ സിഗ്നലിംഗിൽ മാറ്റങ്ങൾക്ക് കാരണമാകും43. ഈ പഠനത്തിൽ, IL-4, IL-17, IFN-γ എന്നിവയുടെ അമിതമായ എക്സ്പ്രഷൻ സാധാരണ രോഗപ്രതിരോധ ഘടകങ്ങളാണ്, ഇത് NP യും MC-കളും തമ്മിലുള്ള അടുത്ത ബന്ധം കൂടുതൽ തെളിയിക്കുന്നു44. ഈ മൃഗ മാതൃക NP മുന്നേറ്റത്തെയും എൻഡ് പ്ലേറ്റിലേക്കുള്ള പ്രവേശനത്തെയും നന്നായി അനുകരിക്കുന്നു. ഈ പ്രക്രിയ MC-യിൽ സ്വയം പ്രതിരോധശേഷിയുടെ സ്വാധീനം കൂടുതൽ വെളിപ്പെടുത്തി.
പ്രതീക്ഷിച്ചതുപോലെ, ഈ മൃഗ മാതൃക MC പഠിക്കാൻ സാധ്യമായ ഒരു പ്ലാറ്റ്‌ഫോം നമുക്ക് നൽകുന്നു. എന്നിരുന്നാലും, ഈ മോഡലിന് ഇപ്പോഴും ചില പരിമിതികളുണ്ട്: ഒന്നാമതായി, മൃഗ നിരീക്ഷണ ഘട്ടത്തിൽ, ചില ഇന്റർമീഡിയറ്റ്-സ്റ്റേജ് മുയലുകളെ ഹിസ്റ്റോളജിക്കൽ, മോളിക്യുലാർ ബയോളജി പരിശോധനയ്ക്കായി ദയാവധം ചെയ്യേണ്ടതുണ്ട്, അതിനാൽ ചില മൃഗങ്ങൾ കാലക്രമേണ "ഉപയോഗശൂന്യമാകും". രണ്ടാമതായി, ഈ പഠനത്തിൽ മൂന്ന് സമയ പോയിന്റുകൾ സജ്ജീകരിച്ചിട്ടുണ്ടെങ്കിലും, നിർഭാഗ്യവശാൽ, ഞങ്ങൾ ഒരു തരം MC (മോഡിക് തരം I മാറ്റം) മാത്രമേ മാതൃകയാക്കിയിട്ടുള്ളൂ, അതിനാൽ മനുഷ്യ രോഗ വികസന പ്രക്രിയയെ പ്രതിനിധീകരിക്കാൻ ഇത് പര്യാപ്തമല്ല, കൂടാതെ എല്ലാ സിഗ്നൽ മാറ്റങ്ങളും നന്നായി നിരീക്ഷിക്കുന്നതിന് കൂടുതൽ സമയ പോയിന്റുകൾ സജ്ജീകരിക്കേണ്ടതുണ്ട്. മൂന്നാമതായി, ടിഷ്യു ഘടനയിലെ മാറ്റങ്ങൾ ഹിസ്റ്റോളജിക്കൽ സ്റ്റെയിനിംഗ് വഴി വ്യക്തമായി കാണിക്കാൻ കഴിയും, എന്നാൽ ചില പ്രത്യേക സാങ്കേതിക വിദ്യകൾക്ക് ഈ മോഡലിലെ സൂക്ഷ്മഘടനാ മാറ്റങ്ങൾ നന്നായി വെളിപ്പെടുത്താൻ കഴിയും. ഉദാഹരണത്തിന്, മുയൽ ഇന്റർവെർടെബ്രൽ ഡിസ്കുകളിൽ ഫൈബ്രോകാർട്ടിലേജിന്റെ രൂപീകരണം വിശകലനം ചെയ്യാൻ പോളറൈസ്ഡ് ലൈറ്റ് മൈക്രോസ്കോപ്പി ഉപയോഗിച്ചു45. MC, എൻഡ്പ്ലേറ്റിൽ NP യുടെ ദീർഘകാല ഫലങ്ങൾക്ക് കൂടുതൽ പഠനം ആവശ്യമാണ്.
ന്യൂസിലാൻഡിലെ അമ്പത്തിനാല് ആൺ വെള്ള മുയലുകളെ (ഏകദേശം 2.5-3 കിലോഗ്രാം ഭാരം, 3-3.5 മാസം പ്രായം) ക്രമരഹിതമായി വ്യാജ ഓപ്പറേഷൻ ഗ്രൂപ്പ്, മസിൽ ഇംപ്ലാന്റേഷൻ ഗ്രൂപ്പ് (ME ഗ്രൂപ്പ്), നാഡി റൂട്ട് ഇംപ്ലാന്റേഷൻ ഗ്രൂപ്പ് (NPE ഗ്രൂപ്പ്) എന്നിങ്ങനെ തിരിച്ചിട്ടുണ്ട്. എല്ലാ പരീക്ഷണ നടപടിക്രമങ്ങളും ടിയാൻജിൻ ആശുപത്രിയിലെ എത്തിക്സ് കമ്മിറ്റി അംഗീകരിച്ചു, കൂടാതെ പരീക്ഷണ രീതികൾ അംഗീകൃത മാർഗ്ഗനിർദ്ദേശങ്ങൾ കർശനമായി പാലിച്ചു.
എസ്. സോബാജിമ 46 ന്റെ ശസ്ത്രക്രിയാ സാങ്കേതികതയിൽ ചില മെച്ചപ്പെടുത്തലുകൾ വരുത്തിയിട്ടുണ്ട്. ഓരോ മുയലിനെയും ലാറ്ററൽ റീകംബൻസി സ്ഥാനത്ത് നിർത്തി, തുടർച്ചയായ അഞ്ച് ലംബർ ഇന്റർവെർടെബ്രൽ ഡിസ്കുകളുടെ (IVDs) മുൻഭാഗം ഒരു പോസ്റ്ററോലാറ്ററൽ റിട്രോപെരിറ്റോണിയൽ സമീപനം ഉപയോഗിച്ച് തുറന്നുകാട്ടി. ഓരോ മുയലിനും ജനറൽ അനസ്തേഷ്യ നൽകി (20% യൂറിഥെയ്ൻ, ചെവി സിര വഴി 5 മില്ലി/കിലോ). വാരിയെല്ലുകളുടെ താഴത്തെ അറ്റത്ത് നിന്ന് പെൽവിക് ബ്രൈമിലേക്കും, പാരാവെർടെബ്രൽ പേശികളിലേക്ക് 2 സെന്റിമീറ്റർ വെൻട്രലിലേക്കും ഒരു രേഖാംശ ചർമ്മ മുറിവ് ഉണ്ടാക്കി. L1 മുതൽ L6 വരെയുള്ള വലത് ആന്ററോലാറ്ററൽ നട്ടെല്ല് മുകളിലുള്ള സബ്ക്യുട്ടേനിയസ് ടിഷ്യു, റിട്രോപെരിറ്റോണിയൽ ടിഷ്യു, പേശികൾ എന്നിവയുടെ മൂർച്ചയുള്ളതും മൂർച്ചയുള്ളതുമായ വിഭജനം വഴി തുറന്നുകാട്ടി (ചിത്രം 6A). L5-L6 ഡിസ്ക് ലെവലിനുള്ള ശരീരഘടനാപരമായ ലാൻഡ്‌മാർക്കായി പെൽവിക് ബ്രൈം ഉപയോഗിച്ചാണ് ഡിസ്ക് ലെവൽ നിർണ്ണയിച്ചത്. L5 വെർട്ടെബ്രയുടെ അവസാന പ്ലേറ്റിന് സമീപം 3 മില്ലീമീറ്റർ ആഴത്തിൽ ഒരു ദ്വാരം തുരത്താൻ 16-ഗേജ് പഞ്ചർ സൂചി ഉപയോഗിക്കുക (ചിത്രം 6B). L1-L2 ഇന്റർവെർടെബ്രൽ ഡിസ്കിലെ ഓട്ടോലോഗസ് ന്യൂക്ലിയസ് പൾപോസസ് ആസ്പിറേറ്റ് ചെയ്യാൻ 5-മില്ലി സിറിഞ്ച് ഉപയോഗിക്കുക (ചിത്രം 6C). ഓരോ ഗ്രൂപ്പിന്റെയും ആവശ്യങ്ങൾക്കനുസരിച്ച് ന്യൂക്ലിയസ് പൾപോസസ് അല്ലെങ്കിൽ പേശി നീക്കം ചെയ്യുക. ഡ്രിൽ ഹോൾ ആഴത്തിലാക്കിയ ശേഷം, ആഴത്തിലുള്ള ഫാസിയ, ഉപരിപ്ലവമായ ഫാസിയ, ചർമ്മം എന്നിവയിൽ ആഗിരണം ചെയ്യാവുന്ന തുന്നലുകൾ സ്ഥാപിക്കുന്നു, ശസ്ത്രക്രിയയ്ക്കിടെ വെർട്ടെബ്രൽ ബോഡിയുടെ പെരിയോസ്റ്റിയൽ ടിഷ്യുവിന് കേടുപാടുകൾ വരുത്താതിരിക്കാൻ ശ്രദ്ധിക്കുക.
(എ) L5–L6 ഡിസ്ക് ഒരു പോസ്റ്റെറോലാറ്ററൽ റിട്രോപെരിറ്റോണിയൽ സമീപനത്തിലൂടെ തുറന്നുകാട്ടപ്പെടുന്നു. (ബി) L5 എൻഡ്പ്ലേറ്റിന് സമീപം ഒരു ദ്വാരം തുരത്താൻ 16-ഗേജ് സൂചി ഉപയോഗിക്കുക. (സി) ഓട്ടോലോഗസ് MF-കൾ വിളവെടുക്കുന്നു.
ചെവിയിലെ സിരയിലൂടെ 20% യൂറിഥെയ്ൻ (5 മില്ലി/കിലോഗ്രാം) നൽകിയാണ് ജനറൽ അനസ്തേഷ്യ നൽകിയത്, ശസ്ത്രക്രിയയ്ക്ക് ശേഷം 12, 16, 20 ആഴ്ചകളിൽ ലംബർ സ്പൈൻ റേഡിയോഗ്രാഫുകൾ ആവർത്തിച്ചു.
ശസ്ത്രക്രിയ കഴിഞ്ഞ് 12, 16, 20 ആഴ്ചകളിൽ കെറ്റാമൈൻ (25.0 mg/kg), ഇൻട്രാവണസ് സോഡിയം പെന്റോബാർബിറ്റൽ (1.2 g/kg) എന്നിവയുടെ ഇൻട്രാമുസ്കുലാർ കുത്തിവയ്പ്പിലൂടെയാണ് മുയലുകളെ ബലിയർപ്പിച്ചത്. ഹിസ്റ്റോളജിക്കൽ വിശകലനത്തിനായി മുഴുവൻ നട്ടെല്ലും നീക്കം ചെയ്യുകയും യഥാർത്ഥ വിശകലനം നടത്തുകയും ചെയ്തു. രോഗപ്രതിരോധ ഘടകങ്ങളിലെ മാറ്റങ്ങൾ കണ്ടെത്താൻ ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ (RT-qPCR), വെസ്റ്റേൺ ബ്ലോട്ടിംഗ് എന്നിവ ഉപയോഗിച്ചു.
ഓർത്തോഗണൽ ലിംബ് കോയിൽ റിസീവർ ഘടിപ്പിച്ച 3.0 T ക്ലിനിക്കൽ മാഗ്നറ്റ് (GE മെഡിക്കൽ സിസ്റ്റംസ്, ഫ്ലോറൻസ്, SC) ഉപയോഗിച്ച് മുയലുകളിൽ MRI പരിശോധനകൾ നടത്തി. ചെവി സിര വഴി 20% യൂറിഥെയ്ൻ (5 mL/kg) ഉപയോഗിച്ച് മുയലുകളെ അനസ്തേഷ്യ നൽകി, തുടർന്ന് 5 ഇഞ്ച് വ്യാസമുള്ള വൃത്താകൃതിയിലുള്ള ഉപരിതല കോയിലിൽ (GE മെഡിക്കൽ സിസ്റ്റംസ്) ലംബാർ മേഖല കേന്ദ്രീകരിച്ച് കാന്തത്തിനുള്ളിൽ സുപൈൻ സ്ഥാപിച്ചു. L3–L4 മുതൽ L5–L6 വരെയുള്ള ലംബാർ ഡിസ്കിന്റെ സ്ഥാനം നിർവചിക്കുന്നതിനായി കൊറോണൽ T2-വെയ്റ്റഡ് ലോക്കലൈസർ ഇമേജുകൾ (TR, 1445 ms; TE, 37 ms) നേടി. ഇനിപ്പറയുന്ന ക്രമീകരണങ്ങൾ ഉപയോഗിച്ച് സാഗിറ്റൽ പ്ലെയിൻ T2-വെയ്റ്റഡ് സ്ലൈസുകൾ നേടി: 2200 ms ന്റെ ആവർത്തന സമയവും (TR) 70 ms ന്റെ എക്കോ സമയവും (TE) ഉള്ള ഫാസ്റ്റ് സ്പിൻ-എക്കോ സീക്വൻസും, മാട്രിക്സ്; 260 ന്റെ വിഷ്വൽ ഫീൽഡും എട്ട് ഉത്തേജകങ്ങളും; കട്ടിംഗ് കനം 2 മില്ലീമീറ്ററായിരുന്നു, വിടവ് 0.2 മില്ലീമീറ്ററായിരുന്നു.
അവസാന ഫോട്ടോ എടുത്ത് അവസാന മുയലിനെ കൊന്നതിനുശേഷം, ഹിസ്റ്റോളജിക്കൽ പരിശോധനയ്ക്കായി ഷാം, പേശി-എംബെഡഡ്, എൻ‌പി ഡിസ്കുകൾ എന്നിവ നീക്കം ചെയ്തു. ടിഷ്യുകൾ 1 ആഴ്ചത്തേക്ക് 10% ന്യൂട്രൽ ബഫേർഡ് ഫോർമാലിൽ ഉറപ്പിച്ചു, എഥിലീൻ ഡയമിനെറ്റെട്രാഅസെറ്റിക് ആസിഡ് ഉപയോഗിച്ച് ഡീകാൽസിഫൈ ചെയ്തു, പാരഫിൻ സെക്ഷൻ ചെയ്തു. ടിഷ്യു ബ്ലോക്കുകൾ പാരഫിനിൽ ഉൾച്ചേർത്ത് ഒരു മൈക്രോടോം ഉപയോഗിച്ച് സാഗിറ്റൽ സെക്ഷൻസ് (5 μm കനം) ആയി മുറിച്ചു. ഭാഗങ്ങൾ ഹെമറ്റോക്സിലിൻ, ഇയോസിൻ (H&E) എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് സ്റ്റെയിൻ ചെയ്തു.
ഓരോ ഗ്രൂപ്പിലെയും മുയലുകളിൽ നിന്ന് ഇന്റർവെർടെബ്രൽ ഡിസ്കുകൾ ശേഖരിച്ച ശേഷം, നിർമ്മാതാവിന്റെ നിർദ്ദേശങ്ങളും ഇംപ്രോം II റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ സിസ്റ്റവും (പ്രോമെഗ ഇൻകോർപ്പറേറ്റഡ്, മാഡിസൺ, WI, യുഎസ്എ) അനുസരിച്ച് ഒരു UNIQ-10 കോളം (ഷാങ്ഹായ് സാംഗോൺ ബയോടെക്നോളജി കമ്പനി ലിമിറ്റഡ്, ചൈന) ഉപയോഗിച്ച് മൊത്തം RNA വേർതിരിച്ചെടുത്തു. റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ നടത്തി.
നിർമ്മാതാവിന്റെ നിർദ്ദേശങ്ങൾ അനുസരിച്ച് പ്രിസം 7300 (അപ്ലൈഡ് ബയോസിസ്റ്റംസ് ഇൻ‌കോർപ്പറേറ്റഡ്, യുഎസ്എ), എസ്‌വൈ‌ബി‌ആർ ഗ്രീൻ ജമ്പ് സ്റ്റാർട്ട് ടാക് റെഡിമിക്സ് (സിഗ്മ-ആൽഡ്രിച്ച്, സെന്റ് ലൂയിസ്, എം‌ഒ, യുഎസ്എ) എന്നിവ ഉപയോഗിച്ചാണ് ആർ‌ടി-ക്യു‌പി‌സി‌ആർ നടത്തിയത്. പി‌സി‌ആർ റിയാക്ഷൻ വോളിയം 20 μl ആയിരുന്നു, അതിൽ 1.5 μl നേർപ്പിച്ച സി‌ഡി‌എൻ‌എയും ഓരോ പ്രൈമറിന്റെയും 0.2 μM ഉം അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു. ഒലിഗോപെർഫെക്റ്റ് ഡിസൈനർ (ഇൻവിട്രോജൻ, വലൻസിയ, സി‌എ) ആണ് പ്രൈമറുകൾ രൂപകൽപ്പന ചെയ്തത്, നാൻജിംഗ് ഗോൾഡൻ സ്റ്റുവർട്ട് ബയോടെക്നോളജി കമ്പനി ലിമിറ്റഡ് (ചൈന) നിർമ്മിച്ചത് (പട്ടിക 1). ഇനിപ്പറയുന്ന തെർമൽ സൈക്ലിംഗ് അവസ്ഥകൾ ഉപയോഗിച്ചു: 94°C-ൽ 2 മിനിറ്റിന് പ്രാരംഭ പോളിമറേസ് ആക്ടിവേഷൻ ഘട്ടം, തുടർന്ന് ടെംപ്ലേറ്റ് ഡിനാറ്ററേഷനായി 94°C-ൽ 15 സെക്കൻഡ് വീതമുള്ള 40 സൈക്കിളുകൾ, 60°C-ൽ 1 മിനിറ്റ് അനീലിംഗ്, എക്സ്റ്റൻഷൻ, ഫ്ലൂറസെൻസ്. 72°C-ൽ 1 മിനിറ്റിന് അളവുകൾ നടത്തി. എല്ലാ സാമ്പിളുകളും മൂന്ന് തവണ ആംപ്ലിഫൈ ചെയ്യുകയും RT-qPCR വിശകലനത്തിനായി ശരാശരി മൂല്യം ഉപയോഗിക്കുകയും ചെയ്തു. ഫ്ലെക്സ്സ്റ്റേഷൻ 3 (മോളിക്യുലാർ ഡിവൈസസ്, സണ്ണിവെയ്ൽ, CA, USA) ഉപയോഗിച്ച് ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ഡാറ്റ വിശകലനം ചെയ്തു. IL-4, IL-17, IFN-γ ജീൻ എക്സ്പ്രഷൻ എന്നിവ എൻഡോജെനസ് കൺട്രോളിലേക്ക് (ACTB) നോർമലൈസ് ചെയ്തു. 2-ΔΔCT രീതി ഉപയോഗിച്ച് ടാർഗെറ്റ് mRNA യുടെ ആപേക്ഷിക എക്സ്പ്രഷൻ ലെവലുകൾ കണക്കാക്കി.
RIPA ലൈസിസ് ബഫറിൽ (പ്രോട്ടീസ്, ഫോസ്ഫേറ്റേസ് ഇൻഹിബിറ്റർ കോക്ടെയിലുകൾ എന്നിവ അടങ്ങിയ) ഒരു ടിഷ്യു ഹോമോജെനൈസർ ഉപയോഗിച്ച് ടിഷ്യൂകളിൽ നിന്ന് മൊത്തം പ്രോട്ടീൻ വേർതിരിച്ചെടുത്തു, തുടർന്ന് 4°C താപനിലയിൽ 20 മിനിറ്റ് 13,000 rpm-ൽ സെൻട്രിഫ്യൂജ് ചെയ്ത് ടിഷ്യു അവശിഷ്ടങ്ങൾ നീക്കം ചെയ്തു. ഓരോ ലെയ്‌നിലും അമ്പത് മൈക്രോഗ്രാം പ്രോട്ടീൻ ലോഡ് ചെയ്തു, 10% SDS-PAGE കൊണ്ട് വേർതിരിച്ച്, തുടർന്ന് ഒരു PVDF മെംബ്രണിലേക്ക് മാറ്റി. മുറിയിലെ താപനിലയിൽ 1 മണിക്കൂർ നേരം 0.1% Tween 20 അടങ്ങിയ ട്രിസ്-ബഫേർഡ് സലൈൻ (TBS) 5% കൊഴുപ്പില്ലാത്ത ഉണങ്ങിയ പാലിൽ ബ്ലോക്കിംഗ് നടത്തി. മുയൽ ആന്റി-ഡെക്കോറിൻ പ്രൈമറി ആന്റിബോഡി (1:200 നേർപ്പിച്ചത്; ബോസ്റ്റർ, വുഹാൻ, ചൈന) (1:200 നേർപ്പിച്ചത്; ബയോസ്, ബീജിംഗ്, ചൈന) ഉപയോഗിച്ച് മെംബ്രൺ രാത്രി മുഴുവൻ 4°C-ൽ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്തു, രണ്ടാം ദിവസങ്ങളിൽ പ്രതിപ്രവർത്തിച്ചു; മുറിയിലെ താപനിലയിൽ 1 മണിക്കൂർ നേരത്തേക്ക് സെക്കൻഡറി ആന്റിബോഡി (ആട് ആന്റി-റാബിറ്റ് ഇമ്യൂണോഗ്ലോബുലിൻ ജി 1:40,000 നേർപ്പിക്കലിൽ) ഉപയോഗിച്ച് കുതിരലാട പെറോക്സിഡേസുമായി (ബോസ്റ്റർ, വുഹാൻ, ചൈന) സംയോജിപ്പിച്ച് പരിശോധന നടത്തി. എക്സ്-റേ വികിരണത്തിന് ശേഷം കെമിലുമിനെസെന്റ് മെംബ്രണിലെ വർദ്ധിച്ച കെമിലുമിനെസെൻസിലൂടെ വെസ്റ്റേൺ ബ്ലോട്ട് സിഗ്നലുകൾ കണ്ടെത്തി. ഡെൻസിറ്റോമെട്രിക് വിശകലനത്തിനായി, ബാൻഡ്‌സ്‌കാൻ സോഫ്റ്റ്‌വെയർ ഉപയോഗിച്ച് ബ്ലോട്ടുകൾ സ്കാൻ ചെയ്ത് അളവ് കണക്കാക്കി, ഫലങ്ങൾ ടാർഗെറ്റ് ജീൻ ഇമ്മ്യൂണോറിയാക്റ്റിവിറ്റിയും ട്യൂബുലിൻ ഇമ്മ്യൂണോറിയാക്റ്റിവിറ്റിയും തമ്മിലുള്ള അനുപാതമായി പ്രകടിപ്പിച്ചു.
SPSS16.0 സോഫ്റ്റ്‌വെയർ പാക്കേജ് (SPSS, USA) ഉപയോഗിച്ചാണ് സ്റ്റാറ്റിസ്റ്റിക്കൽ കണക്കുകൂട്ടലുകൾ നടത്തിയത്. പഠനത്തിനിടെ ശേഖരിച്ച ഡാറ്റ ശരാശരി ± സ്റ്റാൻഡേർഡ് ഡീവിയേഷൻ (ശരാശരി ± SD) ആയി പ്രകടിപ്പിക്കുകയും രണ്ട് ഗ്രൂപ്പുകൾ തമ്മിലുള്ള വ്യത്യാസങ്ങൾ നിർണ്ണയിക്കാൻ വൺ-വേ ആവർത്തിച്ചുള്ള അളവുകളുടെ വേരിയൻസ് വിശകലനം (ANOVA) ഉപയോഗിച്ച് വിശകലനം ചെയ്യുകയും ചെയ്തു. P < 0.05 എന്നത് സ്റ്റാറ്റിസ്റ്റിക്കൽ പ്രാധാന്യമുള്ളതായി കണക്കാക്കി.
അങ്ങനെ, വെർട്ടെബ്രൽ ബോഡിയിൽ ഓട്ടോലോഗസ് എൻ‌പികൾ സ്ഥാപിച്ച് മാക്രോഅനാട്ടമിക്കൽ നിരീക്ഷണം, എംആർഐ വിശകലനം, ഹിസ്റ്റോളജിക്കൽ മൂല്യനിർണ്ണയം, മോളിക്യുലാർ ബയോളജിക്കൽ വിശകലനം എന്നിവ നടത്തി എംസിയുടെ ഒരു മൃഗ മാതൃക സ്ഥാപിക്കുന്നത് മനുഷ്യ എംസിയുടെ സംവിധാനങ്ങൾ വിലയിരുത്തുന്നതിനും മനസ്സിലാക്കുന്നതിനും പുതിയ ചികിത്സാ ഇടപെടലുകൾ വികസിപ്പിക്കുന്നതിനുമുള്ള ഒരു പ്രധാന ഉപകരണമായി മാറിയേക്കാം.
ഈ ലേഖനം എങ്ങനെ ഉദ്ധരിക്കാം: ഹാൻ, സി. തുടങ്ങിയവർ. ലംബാർ നട്ടെല്ലിന്റെ സബ്‌കോണ്ട്രൽ അസ്ഥിയിൽ ഓട്ടോലോഗസ് ന്യൂക്ലിയസ് പൾപോസസ് സ്ഥാപിച്ചുകൊണ്ട് മോഡിക് മാറ്റങ്ങളുടെ ഒരു മൃഗ മാതൃക സ്ഥാപിച്ചു. സയൻസ്. പ്രതിനിധി. 6, 35102: 10.1038/srep35102 (2016).
വെയ്‌ഷൗപ്റ്റ്, ഡി., സനെറ്റി, എം., ഹോഡ്‌ലർ, ജെ., ബൂസ്, എൻ. ലംബർ സ്‌പൈനിന്റെ മാഗ്നറ്റിക് റെസൊണൻസ് ഇമേജിംഗ്: ഡിസ്‌ക് ഹെർണിയേഷന്റെയും നിലനിർത്തലിന്റെയും വ്യാപനം, നാഡി റൂട്ട് കംപ്രഷൻ, എൻഡ് പ്ലേറ്റ് അസാധാരണതകൾ, അസിംപ്റ്റോമാറ്റിക് വോളണ്ടിയർമാരിൽ ഫേസെറ്റ് ജോയിന്റ് ഓസ്റ്റിയോ ആർത്രൈറ്റിസ്. നിരക്ക്. റേഡിയോളജി 209, 661–666, doi:10.1148/റേഡിയോളജി.209.3.9844656 (1998).
ക്ജെർ, പി., കോർഷോം, എൽ., ബെൻഡിക്സ്, ടി., സോറൻസെൻ, ജെ.എസ്, ലെബോഫ്-ഈഡ്, കെ. മോഡിക് മാറ്റങ്ങളും ക്ലിനിക്കൽ കണ്ടെത്തലുകളുമായുള്ള അവയുടെ ബന്ധവും. യൂറോപ്യൻ സ്പൈൻ ജേണൽ: യൂറോപ്യൻ സ്പൈൻ സൊസൈറ്റിയുടെ ഔദ്യോഗിക പ്രസിദ്ധീകരണം, യൂറോപ്യൻ സൊസൈറ്റി ഓഫ് സ്പൈനൽ ഡിഫോർമിറ്റി, യൂറോപ്യൻ സൊസൈറ്റി ഫോർ സെർവിക്കൽ സ്പൈൻ റിസർച്ച് 15, 1312–1319, doi: 10.1007/s00586-006-0185-x (2006).
കുയിസ്മ, എം., തുടങ്ങിയവർ. ലംബാർ വെർട്ടെബ്രൽ എൻഡ്‌പ്ലേറ്റുകളിലെ മോഡിക് മാറ്റങ്ങൾ: മധ്യവയസ്‌കരായ പുരുഷ തൊഴിലാളികളിൽ താഴ്ന്ന നടുവേദനയും സയാറ്റിക്കയും തമ്മിലുള്ള വ്യാപനവും ബന്ധവും. സ്‌പൈൻ 32, 1116–1122, doi:10.1097/01.brs.0000261561.12944.ff (2007).
ഡി റൂസ്, എ., ക്രെസ്സൽ, എച്ച്., സ്പ്രിറ്റ്സർ, കെ., ഡാലിങ്ക, എം. ലംബർ നട്ടെല്ലിന്റെ ഡീജനറേറ്റീവ് രോഗത്തിൽ എൻഡ് പ്ലേറ്റിനടുത്തുള്ള അസ്ഥി മജ്ജ മാറ്റങ്ങളുടെ എംആർഐ. എജെആർ. അമേരിക്കൻ ജേണൽ ഓഫ് റേഡിയോളജി 149, 531–534, ഡിഒഐ: 10.2214/ajr.149.3.531 (1987).
മോഡിക്, എം.ടി., സ്റ്റെയിൻബർഗ്, പി.എം., റോസ്, ജെ.എസ്., മസാരിക്, ടി.ജെ., കാർട്ടർ, ജെ.ആർ. ഡീജനറേറ്റീവ് ഡിസ്ക് ഡിസീസ്: എം.ആർ.ഐ. ഉപയോഗിച്ച് വെർട്ടെബ്രൽ മജ്ജ മാറ്റങ്ങളുടെ വിലയിരുത്തൽ. റേഡിയോളജി 166, 193–199, doi:10.1148/റേഡിയോളജി.166.1.3336678 (1988).
മോഡിക്, എം.ടി., മസാരിക്, ടി.ജെ., റോസ്, ജെ.എസ്., കാർട്ടർ, ജെ.ആർ. ഡീജനറേറ്റീവ് ഡിസ്ക് ഡിസീസ് ഇമേജിംഗ്. റേഡിയോളജി 168, 177–186, ഡി.ഒ.ഐ.: 10.1148/റേഡിയോളജി.168.1.3289089 (1988).
ജെൻസെൻ, ടി.എസ്., തുടങ്ങിയവർ. പൊതുജനങ്ങളിൽ നിയോവെർടെബ്രൽ എൻഡ്‌പ്ലേറ്റ് (മോഡിക്) സിഗ്നൽ മാറ്റങ്ങളുടെ പ്രവചകർ. യൂറോപ്യൻ സ്‌പൈൻ ജേണൽ: യൂറോപ്യൻ സ്‌പൈൻ സൊസൈറ്റിയുടെ ഔദ്യോഗിക പ്രസിദ്ധീകരണം, യൂറോപ്യൻ സൊസൈറ്റി ഓഫ് സ്‌പൈനൽ ഡിഫോർമിറ്റി, യൂറോപ്യൻ സൊസൈറ്റി ഫോർ സെർവിക്കൽ സ്‌പൈൻ റിസർച്ച്, ഡിവിഷൻ 19, 129–135, doi: 10.1007/s00586-009-1184-5 (2010).
ആൽബർട്ട്, എച്ച്ബി, മാനിഷ്, കെ. ലംബർ ഡിസ്ക് ഹെർണിയേഷനുശേഷം മോഡിക് മാറ്റങ്ങൾ. യൂറോപ്യൻ സ്പൈൻ ജേണൽ: യൂറോപ്യൻ സ്പൈൻ സൊസൈറ്റിയുടെ ഔദ്യോഗിക പ്രസിദ്ധീകരണം, യൂറോപ്യൻ സൊസൈറ്റി ഓഫ് സ്പൈനൽ ഡിഫോർമിറ്റി, യൂറോപ്യൻ സൊസൈറ്റി ഫോർ സെർവിക്കൽ സ്പൈൻ റിസർച്ച് 16, 977–982, doi: 10.1007/s00586-007-0336-8 (2007).
കെർട്ടൂല, എൽ., ലുവോമ, കെ., വെഹ്മാസ്, ടി., ഗ്രോൺബ്ലാഡ്, എം., കാപ്പ, ഇ. മോഡിക് ടൈപ്പ് I മാറ്റങ്ങൾക്ക് വേഗത്തിൽ പുരോഗമിക്കുന്ന ഡിഫോർമേഷൻ ഡിസ്ക് ഡീജനറേഷൻ പ്രവചിക്കാൻ കഴിയും: ഒരു വർഷത്തെ പ്രോസ്പെക്റ്റീവ് പഠനം. യൂറോപ്യൻ സ്പൈൻ ജേണൽ 21, 1135–1142, doi: 10.1007/s00586-012-2147-9 (2012).
ഹു, ഇസഡ്ജെ, ഷാവോ, എഫ്ഡി, ഫാങ്, എക്സ്ക്യു, ഫാൻ, എസ്ഡബ്ല്യു മോഡിക് മാറ്റങ്ങൾ: ലംബർ ഡിസ്ക് ഡീജനറേഷനുള്ള സാധ്യമായ കാരണങ്ങളും സംഭാവനയും. മെഡിക്കൽ ഹൈപ്പോത്തസസ് 73, 930–932, doi: 10.1016/j.mehy.2009.06.038 (2009).
ക്രോക്ക്, എച്ച്.വി. ആന്തരിക ഡിസ്ക് പൊട്ടൽ. 50 വർഷത്തിലേറെയായി ഡിസ്ക് പ്രോലാപ്സ് പ്രശ്നങ്ങൾ. നട്ടെല്ല് (ഫില പാ 1976) 11, 650–653 (1986).